[发明专利]一种液相色谱-串联质谱检测多菌灵及其代谢物的方法

说明书

本发明公开了一种液相色谱‑串联质谱检测多菌灵及其代谢物的方法，涉及食用菌检测技术领域。该方法包括：用乙腈与待测样品混合进行提取，再加入NaCl，混匀后离心，净化后取上清液制备成样品检测液；吸取所述样品检测液注入液相色谱‑串联质谱仪进行检测。该方法可以实现对样品中的多菌灵及其代谢物2‑氨基苯并咪唑、2‑羟基苯并咪唑和苯并咪唑同时检测。该方法具有较高的准确度、精密度和灵敏度。

技术领域

本发明涉及食用菌检测技术领域，具体而言，涉及一种液相色谱-串联质谱检测多菌灵及其代谢物的方法。

背景技术

多菌灵是苯并咪唑类杀菌剂，其内吸性强，杀菌谱广，主要用于防治由子囊菌、半知菌和担子菌引起的大田作物、蔬菜、水果等作物上的多种病害。多菌灵属于低毒杀菌剂，化学性质稳定，在自然环境中降解半衰期长，可通过食物链影响人体健康。多菌灵在植物体内可降解为2-氨基苯并咪唑(2-AB)，而2-AB对人体皮肤及眼睛有毒害作用。Rouchaud等人在胡萝卜、草莓和苹果中除了检测出含有2-AB外，同时还有苯并咪唑、2-氨基苯并咪唑、邻苯二胺、苯胺等有毒有机物。

经前期调研发现在双孢蘑菇的种植过程中会大量使用多菌灵，因此研究多菌灵及其代谢物的检测方法对监控和加强双孢蘑菇的安全状况具有重要意义。苯并咪唑类农药的检测方法主要有紫外-可见分光光度法、薄层色谱检测法、免疫化学法、气相色谱法、离子交换色谱法、高效液相色谱(HPLC)法和液相色谱-质谱联用(LCMS)法等。采用液相色谱测定番茄中的多菌灵和噻菌灵及采用超高相液相色谱-串联质(UPLC-MS/MS)技术同时测定苹果中多菌灵、噻菌灵和甲基硫菌灵已有报道，但是同时测定食用菌中多菌灵及其代谢物2-氨基苯并咪唑、2-羟基苯并咪唑和苯并咪唑残留的方法尚未见报道。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种液相色谱-串联质谱检测多菌灵及其代谢物的方法。该方法可以实现对样品中的多菌灵及其代谢物2-氨基苯并咪唑、2-羟基苯并咪唑和苯并咪唑同时检测。

本发明是这样实现的：

本发明提供的一种液相色谱-串联质谱检测多菌灵及其代谢物的方法，所述代谢物包括2-氨基苯并咪唑、2-羟基苯并咪唑和苯并咪唑，其包括如下步骤：

样品检测液制备步骤：用乙腈与待测样品混合进行提取，再加入NaCl，混匀后离心，净化后取上清液制备成样品检测液；

液相色谱-串联质谱检测步骤：吸取所述样品检测液注入液相色谱-串联质谱仪进行检测。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，在液相色谱-串联质谱检测步骤中，所用的液相色谱条件如下：

流动相A：甲醇，流动相B：含乙酸铵和甲酸的水溶液；流速：0.4mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；柱温：45℃；进样量：5μL。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，梯度洗脱的程序如下：