[发明专利]一种黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法

权利要求书

1.一种黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法，其特征在于：包括下列步骤：

步骤1、黑小麦麸皮中花色苷的提取

将黑小麦麸皮加入酸化甲醇提取剂中，超声提取15-25min，然后对提取液进行离心，得到上清液；

步骤2、标准曲线的绘制

S1、将矢车菊-3,0-葡萄糖苷作为标准对照品，加入至体积分数为70％的甲醇溶液中溶解，定容后即得标准对照品储备液，放入-20℃冰箱中冷藏，备用；

S2、然后将所述标准对照品储备液稀释不同倍数，用高效液相法，在波长525nm下测定其吸收峰，以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线；

步骤3、高效液相测定

色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：A为乙腈，B为体积分数为0.2％的甲酸水溶液；检测波长：525nm；柱温：25℃；进样量：10μL，进行梯度洗脱；将上清液用0.22μm滤膜过滤，然后注入高效液相色谱仪，比较样品和标准品的高效液相色谱图，依组份保留时间进行定性分析，与标准品的高效液相色谱图中相同时间的峰面积与标准曲线比较进行定量分析；

按公式(1)计算黑小麦麸皮中矢车菊-3,0-葡萄糖苷含量；

公式(1)中，ω为花色苷质量分数，单位为mg/g；p为测定的花色苷浓度，单位为mg/mL；V为样品提取液的体积，单位为mL；m为样品总质量，单位为g。

2.根据权利要求1所述的黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法，其特征在于：所述酸化甲醇提取液的体积分数为70％，由甲醇、盐酸和水按照体积比70∶0.5∶29.5混合后制得；所述盐酸的体积分数为36％。

3.根据权利要求1所述的黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱方法如下表：

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4.根据权利要求1所述的黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法，其特征在于：步骤1中，将0.5克黑小麦麸皮样品，加入2mL体积分数为70％的酸化甲醇提取剂中，60℃条件下超声提取20min，5000r/min离心15min，重复提取3次，合并后得到上清液，放入-20℃冰箱中冷藏，备用。

5.根据权利要求1所述的黑小麦麸皮中花色苷的高效液相色谱检测方法，其特征在于：所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18色谱柱。