[发明专利]一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法在审
申请号: | 201910007876.1 | 申请日: | 2019-01-04 |
公开(公告)号: | CN109486891A | 公开(公告)日: | 2019-03-19 |
发明(设计)人: | 洪鹏志;刘唤明;周春霞;邓楚津;杨萍 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/14 |
代理公司: | 深圳市兴科达知识产权代理有限公司 44260 | 代理人: | 杨小东 |
地址: | 524000 广东省湛江*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鱼皮胶原蛋白 小分子 酶解处理 酶解 制备 蛋白酶 脱色 鱼皮 预处理 蛋白质降解 改性活性炭 工业化规模 分散均匀 市场潜力 脱腥效果 脱脂处理 吸附性能 原料准备 酶解液 应用 生产 | ||
1.一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
S1、原料准备:取新鲜鱼类采集鱼皮,将鱼皮洗净,沥干鱼皮表面的水,将鱼皮切碎;
S2、脱脂处理:往切碎的鱼皮中加入氢氧化钠和水,搅拌20-30min后静置4-6h,滤去水,对鱼皮进行脱脂处理,脱脂结束将鱼皮冲洗2-3次;
S3、酶解预处理:向脱脂的碎鱼皮中加入2-4倍碎鱼皮质量的去离子水,打浆并混合,得到浆液;
S4、酶解处理:向浆液中加入蛋白酶进行酶解得到酶解液;
S5、灭活处理:将酶解液进行灭酶活性处理,得到灭酶酶解液;
S6、离心处理:将灭酶酶解液置于离心机中进行离心,取上清液;
S7、脱色处理:利用脱色剂对上清液进行脱色处理;
S8、去腥处理:利用去腥树脂对滤清液进行去腥处理;
S9、纳滤处理:采用纳滤膜酶解液进行纳滤处理,得到小分子蛋白酶解液;
S10、将小分子蛋白酶解液浓缩,喷雾干燥,得到小分子鱼皮胶原蛋白肽。
2.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S2中,氢氧化钠的添加量为鱼皮质量的1-2%,水的加入量为鱼皮质量的2-4倍。
3.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S4中,酶解的具体过程为:先加入浆液重量0.1-0.2%的风味蛋白酶,调节pH值至6.5-7.5,将浆液加热至55-65℃,酶解1.5-2.5h;再加入浆液重量0.1-0.2%的中性蛋白酶,50-60℃的条件下酶解2-3h;然后降温至40-50℃,加入浆液重量0.05-0.1%的肽酶,40-50℃条件下酶解1-2h;加入浆液重量0.05-0.1%的碱性蛋白酶,调节pH值至8-9,40-50℃条件下酶解2-3h;加入浆液重量0.1-0.2%的胶原酶,调节pH值至7.0,40-50℃条件下酶解2-3h。
4.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S5中,灭活处理的过程为将酶解液在90-100℃水浴下灭酶活性15-20min。
5.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S6中,离心机的转速为3000-5000r/min。
6.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S7中,脱色处理的具体过程为:将上清液升温到50-70℃,调节pH为5-7,加入酶解液重量1-3%的改性活性炭,超声搅拌10-20min,过滤,得到滤清液。
7.根据权利要求6所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述改性活性炭的制备方法为:按料液比为1:8-12g/mL将活性炭放入浓度为0.8-1.2M的氢氧化钠溶液中浸泡45-50h,然后用去离子水快速洗涤2-3次,再将活性炭放入含有柠檬黄和苯甲酸钠的乙酸乙酯中,在75-85℃下搅拌25-35h,取出活性炭干燥,即得改性活性炭。
8.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S8中,去腥处理的过程为:控制滤清液的pH值为4.5-5.5,将滤清液置于去腥树脂中,滤清液在去腥树脂中停留的时间为15-60min。
9.根据权利要求8所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述去腥树脂可以为离子交换树脂、吸附树脂或鳌合树脂中的任意一种。
10.根据权利要求1所述的一种小分子鱼皮胶原蛋白肽的提取制备方法,其特征在于,所述步骤S8中,纳滤处理的过程为:将去腥后的滤清液通过第一层纳滤膜,第一层纳滤膜的截留分子量为2000道尔顿,再将第一层纳滤膜的透过液通过第二层纳滤膜,第二层纳滤膜的截留的分子量为500道尔顿,被第二层纳滤膜截留的截留液的分子量为500-2000道尔顿,为小分子蛋白酶解液。
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