[发明专利]一种骨髓细胞培养基

说明书

本发明公开了一种骨髓细胞培养基，其在基础培养基中添加了抗生素和固体血清替代物。利用本发明提供的培养基培养后的骨髓细胞可用于染色体制片，并表现出染色体呈现状态良好，更易观察等优势，在医学检测领域具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种骨髓细胞培养基，具体涉及一种用于染色体核型分析的骨髓细胞培养基。

背景技术

人们用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术成为显带技术(banding technique)。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，而G带由于主要是被Giemsa染料染色后显带，且所显示的带纹分布在整个染色体上，因此在目前众多的显带技术中(Q带、G带、C带、R带、T带)，G带是被广泛应用的一种带型。

染色体核型分析是以分裂中期染色体为研究对象，根据染色体的长度、着丝点位置、长短臂比例、随体的有无等特征，并借助显带技术对染色体进行分析、比较、排序和编号，根据染色体结构和数目的变异情况来进行诊断。核型分析可以为细胞遗传分类、物种间亲缘的关系以及染色体数目和结构变异的研究提供重要依据。

染色体畸形病变与恶性血液病之间具有紧密相关性，骨髓细胞染色体核型分析应用于恶性血液病的临床诊断、治疗以及预后具有非常重要的意义。然而骨髓染色体的制备过程复杂，影响因素众多，常常出现可分析分裂象少，染色体粗短，分散不良等现象，大大降低了染色体核型分析的成功率，且成本较高。

因此，建立一种具有细胞生长状态好、染色体呈现的状态好、更容易观察等特征的骨髓细胞培养基尤为重要。

发明内容

为克服现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种骨髓细胞培养基，使培养出的骨髓细胞用于染色体G带制片时背景更加清晰、分裂相更多、形态及分散度更加良好，从而便于观察。

本发明是通过如下技术方案得以实现上述目的。

第一方面，本发明提供了一种骨髓细胞培养基，所述培养基中含有RPMI-1640基础培养基、血清、抗生素。

优选地，所述骨髓细胞培养基中RPMI-1640基础培养基中还含有谷氨酰胺。

优选地，所述谷氨酰胺的浓度为1-4mmol/L，更优选地，谷氨酰胺的浓度为3mmol/L。

优选地，所述血清为固体血清替代物或胎牛血清，更优选为固体血清替代物。

优选地，所述固体血清替代物的浓度为0.5-2g/L，最优选地，所述固体血清替代物的浓度为1g/L。

优选地，所述抗生素为青霉素和/或链霉素。

优选地，所述抗生素的浓度为50-100ug/ml。

第二方面，本发明提供了一种骨髓细胞培养及染色体制片的方法，所述方法包括如下步骤：

1)向装有本发明第一方面所述骨髓细胞培养基的器皿中接种骨髓细胞穿刺液；

2)对步骤1接种有骨髓穿刺液的骨髓细胞培养基进行培养；

3)向步骤2所述培养器皿中加入秋水仙胺终止培养；

4)对步骤3终止培养的细胞进行离心处理，去除上清收集细胞；

5)对步骤4所收集细胞进行低渗处理；

6)对步骤5低渗处理后的细胞进行离心处理，去除上清收集细胞；

7)向步骤6收集细胞中加入固定液，进行固定处理；

8)重复步骤6和7；

9)将步骤8固定处理后的细胞悬液滴至载玻片并晾干；