[发明专利]靶向CD19的嵌合抗原受体及其用途

说明书

本发明涉及靶向CD19的嵌合抗原受体及其用途。具体而言，本发明提供一种融合蛋白，所述融合蛋白选自：(1)含有依次连接的CD8抗原的前导肽、抗CD19单链抗体、人CD8α铰链区、人CD28跨膜区、人CD28胞内区和人CD3ζ胞内区的融合蛋白；和(2)在(1)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且保留活化T细胞活性的由(1)衍生的融合蛋白。本发明还提供所述融合蛋白的编码序列、含所述编码序列的载体，以及所述融合蛋白、编码序列、载体的用途。

本发明专利申请是发明名称为“靶向CD19的嵌合抗原受体及其用途”、申请号为201610377871.4的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于嵌合抗原受体领域，具体涉及靶向CD19的嵌合抗原受体及其用途。

背景技术

嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor-T cell，CAR-T)T细胞是指经基因修饰后，能以MHC非限制性方式识别特定目的抗原，并且持续活化扩增的T细胞。2012年国际细胞治疗协会年会中指出生物免疫细胞治疗已经成为手术、放疗、化疗外的第四种治疗肿瘤的手段，并将成为未来肿瘤治疗必选手段。CAR-T细胞回输治疗是当前肿瘤治疗中最明确有效的免疫治疗形式。大量研究表明，CAR-T细胞可以有效的识别肿瘤抗原，引起特异性的抗肿瘤免疫应答，显著改善患者的生存状况。

嵌合抗原受体(CAR)是CAR-T的核心部件，赋予T细胞HLA非依赖的方式识别肿瘤抗原的能力，这使得经过CAR改造的T细胞相较于天然T细胞表面受体TCR能够识别更广泛的目标。CAR的基础设计中包括一个肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen，TAA)结合区(通常来源于单克隆抗体抗原结合区域的scFV段)，一个胞外铰链区，一个跨膜区和一个胞内信号区。目标抗原的选择对于CAR的特异性、有效性以及基因改造T细胞自身的安全性来讲都是关键的决定因素。

随着嵌合抗原受体T细胞技术的不断发展，目前CAR-T主要可划分为四代。

第一代CAR-T细胞由胞外结合区-单链抗体(single-chain fragment variable，scFV)、跨膜区(transmembrane region，TM)和胞内信号区——免疫受体酪氨酸活化基序(immunoreceptortyrosine-based activation motif，ITAM)组成，其中嵌合抗原受体各部分按如下形式连接：scFv-TM-CD3ζ。第一代CAR虽然能够看到一些特异性的细胞毒性，但2006年对其进行临床试验总结的时候却发现疗效差强人意。究其原因是因为第一代CAR-T细胞在病人体内很快就会耗竭，其持久性(persistence)很差，以至于CAR-T细胞还没有来得及接触到大量的肿瘤细胞时就已经凋亡了。该种CAR-T细胞可以激发抗肿瘤的细胞毒性效应，但是细胞因子分泌比较少，但其在体内的存活期较短不能激发持久的抗肿瘤效应〔Zhang T等，Chimeric NKG2D-modified T cells inhibit systemic T-cell lymphomagrowth in a manner involving multiple cytokines and cytotoxic pathways，CancerRes 2007，67(22):11029-11036〕。