[发明专利]一种卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法

权利要求书

1.一种卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤（1），卷烟烟气抽吸：

每支烟抽吸持续时间2-5s，抽吸频率30-60s，抽吸容量35.0-50ml/2s，抽吸口数4-6口，得到卷烟烟气；

步骤（2），烟气稀释：

将步骤（1）得到的卷烟烟气与洁净空气按体积比为1:10-1:100的配比稀释混匀，后进入口鼻式暴露系统；

所述的洁净空气是空气经高效空气过滤器过滤所得；

步骤（3），小鼠暴露：

将小鼠束缚在固定筒中适应15-30min后，将装有小鼠的固定筒安装在口鼻式暴露系统上，内缸正压烟气气流进入动物鼻部，呼出气流从侧面被吸入外缸，进行卷烟烟气抽吸；每日进行一次暴露过程，持续14-28d；

步骤（4），TVOC浓度测定：

小鼠每天暴露后，在口鼻式暴露系统上进行采样，之后测量所采样品的TVOC浓度；

步骤（5），肺部灌洗：

对持续暴露14-28d后的小鼠用1ml无菌生理盐水灌注进行肺部灌洗，灌洗液离心，取上清液；

步骤（6），ELISA测试：

用ELISA方法检测上清液中TNF-α含量；

步骤（7），相关性分析：对多种牌号的卷烟采用步骤（1）~步骤（6）的发方法进行试验，然后对测得的TVOC浓度与TNF-α含量进行相关性分析；

步骤（8），判断：根据步骤（7）得到的相关性分析结果，判断除步骤（7）牌号的其它待测牌号卷烟引起TNF-α表达情况。

2.根据权利要求1所述的卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法，其特征在于，步骤（1）中，抽吸采用十通道转盘式吸烟机。

3.根据权利要求1所述的卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的洁净空气是空气经高效空气过滤器连续过滤3次所得。

4.根据权利要求1所述的卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法，其特征在于，口鼻式暴露系统上安装有多只小鼠。

5.根据权利要求1所述的卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法，其特征在于，步骤（3）中，暴露期间实时监测暴露仓内环境参数，包括温度、相对湿度、氧气浓度、CO₂浓度，每隔30min记录一次数据，如超过其标准差的5%，则说明暴露环境不稳定，需要重新进行小鼠暴露试验。

6.根据权利要求1所述的卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法，其特征在于，步骤（4）测TVOC浓度测定时，每天均采样多次，每次采样测定多次。