[发明专利]一种黑骨藤有效部位群的检测方法

权利要求书

1.一种黑骨藤有效部位群的检测方法，其特征在于：所述检测方法是对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂进行含量测定；

所述的对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂进行含量测定是：

对照品溶液的制备：精密称取对照品绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂，置于容量瓶中，溶解，摇匀，制成对照品溶液；

供试品溶液的制备：所述的供试品溶液按下述步骤进行制备：

①取过40目筛的黑骨藤药材粉末100 g，分别加8倍、6倍、6倍70 %乙醇回流提取3次，提取时间对应为1.5 h、1 h、1 h，粗过滤后抽滤，旋至无醇味，定容于1000 mL容量瓶中，摇匀，上D-101大孔吸附树脂富集，过夜；依次用1200 mL蒸馏水、2500 mL70 %乙醇、3000 mL95 %乙醇冲柱，将70 %乙醇部分旋至近膏状，干燥，称重后取出，密封放于4～9℃冰箱中，得黑骨藤有效部位群粉末；

②取黑骨藤有效部位群粉末50 mg，置于10 mL容量瓶中加70 %色谱甲醇溶解并稀释至刻度线，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，得供试品溶液；

色谱条件：色谱柱为Xtimate C₁₈，4.6×250 mm，5 μm；流动相：乙腈为A相，0.2 %磷酸水溶液为B相，梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量10 μL；检测波长330 nm和280 nm；柱温30℃；0～15min，10%→10%A；15～30min，10%→18%A；30～45min，18%→18%A；45～50min，18%→20%A；50～55min，20%→20%A；55～65min，20%→21%A；65～80min，21%→21%A；

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，在上述色谱条件下，分别测量绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂峰的面积，计算，即得。

2.如权利要求1中所述的黑骨藤有效部位群的检测方法，其特征在于：所述对照品溶液这样制备：精密称取对照品绿原酸5.02 mg、隐绿原酸5.06 mg、新绿原酸5.13 mg、异绿原酸C5.23 mg和原花青素A₂5.38 mg，置于5 mL容量瓶中，溶解，摇匀，制成绿原酸质量浓度为1.004 mg/mL、隐绿原酸质量浓度为1.012 mg/mL、新绿原酸质量浓度为1.026 mg/mL、异绿原酸质量浓度为1.046 mg/mL和原花青素A₂质量浓度为1.076 mg/mL的对照品溶液。