[发明专利]一种黑骨藤有效部位群的检测方法

说明书

本发明公开了一种黑骨藤有效部位群的检测方法。本发明对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂的含量进行检测，所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为黑骨藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定奠定基础。有助于在生产上确定药材适宜生长区，指导药材采收。

技术领域

本发明涉及一种黑骨藤有效部位群的检测方法，属于药品技术的领域。

背景技术

黑骨藤(Periploca forrestii Schltr.) 属于萝摩科(Asclepiadaceae)杠柳属Periploca )植物，收载于2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》，具有祛风除湿、活血通络、消痹止痛的功能，可舒筋活络、祛风除湿；主治风湿性关节 炎、跌打损伤、胃痛、消化不良、闭经、痢疾等。

黑骨藤是常用苗药之一，是黑骨藤追风活络胶囊、黑骨藤伸筋透骨液、黑骨藤伸筋透骨喷雾剂的重要组成药味。目前，黑骨藤仍执行的是2003 版《贵州省中药材、民族药材质量标准》，此标准中只有来源、性状、显微鉴别和理化鉴别等项目，没有对其药效成分进行定性和定量检测，难以控制药材及其成方制剂的质量，无法保证临床用药的安全性和有效性。然而，近几年对黑骨藤的研究多集中在化学成分、总皂苷、总黄酮的含量测定和药理作用等方面，未见关于绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂含量测定方法的研究报道。限制了对苗药黑骨藤的进一步开发利用。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种黑骨藤有效部位群的检测方法。本发明对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂的含量进行检测，所述检测方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为黑骨藤药材质量控制和评价提供依据，并为药材最佳产地的确定奠定基础。有助于在生产上确定药材适宜生长区，指导药材采收。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案实现：一种黑骨藤有效部位群的检测方法，所述检测方法是对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂进行含量测定。

前述的黑骨藤有效部位群的检测方法中，所述的对绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂进行含量测定是：

对照品溶液的制备：精密称取对照品绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂，置于容量瓶中，溶解，摇匀，制成对照品溶液；

供试品溶液的制备：取黑骨藤有效部位群粉末，置于容量瓶中加色谱甲醇溶解并稀释，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，取续滤液，即得；

色谱条件：色谱柱为Xtimate C₁₈，4.6×250 mm，5 μm；流动相：乙腈为A相，0.2 %磷酸水溶液为B相，梯度洗脱；流速1 mL/min；进样量10 μL；检测波长330 nm和280 nm；柱温30℃；

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，在上述色谱条件下，分别测量绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、异绿原酸C和原花青素A₂峰的面积，计算，即得。

前述的黑骨藤有效部位群的检测方法中，所述的供试品溶液按下述步骤进行制备：

①取过40目筛的黑骨藤药材粉末100 g，分别加8倍、6倍、6倍70 %乙醇回流提取3次，提取时间对应为1.5 h、1 h、1 h，粗过滤后抽滤，旋至无醇味，定容于1000 mL容量瓶中，摇匀，上D-101大孔吸附树脂富集，过夜；依次分别用1200 mL蒸馏水、2500 mL70 %乙醇、3000 mL95 %乙醇冲柱，将70 %乙醇部分旋至近膏状，干燥，称重后取出，密封放于4~9℃冰箱中，得黑骨藤有效部位群粉末；