[发明专利]一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法

说明书

本发明公开了一种L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法。它是将L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐样品溶解后顶空进样，采用GC‑ECD检测方法对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量，并进行了方法学验证，该方法具有专属性强、快速、灵敏等优点。本发明首次建立了采用GC‑ECD检测方法对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的定性和定量方法，便于对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐的质量进行控制。

技术领域

本发明涉及一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的杂质——氯乙烷的气相色谱检测方法，属于医药技术领域。

背景技术

L-谷氨酸二乙酯盐酸盐是培美曲塞二钠合成过程中的关键中间体。培美曲塞二钠是一种结构上含有核心为吡咯嘧啶基团的抗叶酸制剂，通过破坏细胞内叶酸依赖性的正常代谢过程，抑制细胞复制，从而抑制肿瘤的生长。

氯乙烷是L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的反应物料，且氯乙烷为基因毒性杂质，http://toxnet.nlm.nih.gov/cpdb/明确收载氯乙烷的半数致癌量TD₅₀为1810(mg/kg/day)，因此应制定氯乙烷在L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的检测方法，对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的质量进行控制。但经检索，目前尚无关于氯乙烷在L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的含量气相色谱仪检测方法的报道。

氯乙烷，英文名称：Chloroethane，分子式：C₂H₅Cl；分子量：64.51，结构式如下所示：

发明内容

针对上述问题，本发明首次提供了一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中杂质氯乙烷的气相色谱检测方法。该方法顶空进样后采用GC-ECD检测方法对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量，并进行了方法学验证。经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏、准确等优点，能够可靠地对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中杂质——氯乙烷进行定性定量分析。

本发明的技术方案是：一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，将L-谷氨酸二乙酯盐酸盐样品溶解后顶空进样，采用GC-ECD检测方法对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量。

其中，色谱条件为：

色谱柱：硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP，柱温：程序升温23±2℃保持15±2min，以10±1℃/min的速率升至80±5℃，保持1-3min；进样口模式：分流，分流比：18-22∶1，进样口温度：180±20℃，检测器：电子捕获检测器(ECD)，温度270±20℃。

顶空条件为：平衡温度：60±5℃，平衡时间：20±5min。

优选色谱条件：

色谱柱：硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP(30m×0.32mm，0.25μm)，柱温：程序升温23℃保持15min，以10℃/min的速率升至80℃，保持2min；载气：氮气，流速：1ml/min，模式：分流，分流比：20∶1，进样口温度：180℃，检测器：电子捕获检测器(ECD)，温度270℃。

顶空条件为：

平衡温度：60℃，平衡时间：20min，定量环温度：70℃，传输线温度：80℃，

顶空瓶体积：20ml，加液体积：5ml。

进一步的，本发明采用外标法测定L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷。

进一步的，在本发明的检测条件下，氯乙烷峰RT为3.5±0.1min，L-谷氨酸二乙酯盐酸盐不出峰。

本发明的优势是：