[发明专利]一株可用于富硒培养的双歧杆菌及其活性蛋白和应用

说明书

本发明公开了一种新的双歧杆菌DD98，其16SrDNA核苷酸序列如SEQ ID No：1所示，进一步的，所述双歧杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16573。本发明所述双歧杆菌DD98可以耐受较高的硒压力，可用于富硒培养，并且具有良好的肠道定殖能力，提取得到的水溶性蛋白具有肠道保护功能。本发明所述双歧杆菌DD98能够缓解由高脂饮食及酒精共同引起的肝损伤，对肝脏具有保护作用。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种双歧杆菌及其活性蛋白和应用，进一步的，该双歧杆菌可经富硒培养制备成富硒益生菌。

背景技术

益生菌是一类能够对宿主产生有益作用的微生物，与人体的健康密切相关。益生菌一般定植于人体的肠道和生殖系统内，对于维持人体内微生态平衡具有重要作用。已有的研究结果表明，人体微生物群的稳定对于维持人体健康非常重要，衰老、高血压、糖尿病及肠道疾病等都与人体微生物群有关。人体内的微生物群失衡，会直接或间接导致这些疾病的产生。双歧杆菌是人体中常见的一种生理性益生菌，定植于人体的胃肠道内，对于维持和调节人体内的肠道菌群十分重要。许多研究表明，以乳酸菌、双歧杆菌等益生菌制备得到的活菌制剂，可以代替抗生素，起到保护肠道，维持肠道平衡的作用，从而防治腹泻、便秘等消化疾病，并具有许多明显的益生功效，如降糖、降胆固醇、保护肝脏、增强免疫、抗癌等。根据最新的(2004年)伯杰细菌鉴定手册，基于16SrDNA测序技术得到的双歧杆菌共分成34个不同的种，包括青春双歧杆菌、角双歧杆菌、动物双歧杆菌、星状双歧杆菌、两歧双歧杆菌、牛双歧杆菌、短双歧杆菌、齿双歧杆菌、婴儿双歧杆菌(即，长双歧杆菌婴儿亚种)、乳双歧杆菌(即，动物双歧乳脂亚种)、长双歧杆菌、假小链双歧杆菌以及嗜热双歧杆菌和嗜酸热双歧杆菌，等等。专利CN200910136613.7报道了一株对肠道上皮细胞具有黏附能力，具有调节菌群功能的双歧杆菌BBMN68。专利CN201110388295.0报道了一株能够缓解胃肠道功能紊乱症状的婴儿双歧杆菌菌株IFA09。

硒是是人体必需的微量元素之一，可以参与合成各种硒代氨基酸以及多种硒代蛋白(酶)。硒元素本身以及由其合成的硒蛋白具有很多生物学活性，如抗氧化、抗肿瘤、增强人体免疫等，因此硒与人体的健康密切关系。世界卫生组织提出，硒是促进人类生命健康必不可少的一种微量元素，如果在日常生活中合理摄取硒元素，可以有效预防多种疾病的发生。富硒酵母是目前市场上应用较为广泛的补硒产品，酵母作为转化载体可以将外界的无机硒转化为有机硒，更有利于人体的吸收。除此之外，双歧杆菌，乳杆菌一类的益生菌也可用于硒的培养与转化。与富硒酵母相比，由于益生菌本身的益生作用，因此富硒益生菌可能会具有更优的生物活性。

虽然双歧杆菌是GRAS(公认安全)的益生菌，研究表明其被人体摄入之后能够发挥多种益生功能。然而，目前国内外可用到食品中的双歧杆菌菌株寥寥无几，这是因为双歧杆菌经口摄入人体以后，多种因素会影响其在人体肠道内定殖，例如，胃部低pH值的高酸性环境以及其内存在的消化酶，酸性环境会降低质子动力，破坏双歧杆菌细胞内外的渗透压平衡；小肠内高浓度的胆盐和内源性的抗菌肽还有肠道固有菌群对机体的防御系统，甘氨胆酸盐和牛黄胆盐具有细胞膜毒性，胆盐水解酶活性高的双歧杆菌将胆盐水解成次级胆盐能够降低其细胞膜毒性；双歧杆菌粘附到肠道上皮细胞的能力大小以及能否利用不被宿主消化代谢的营养物质(某些蛋白质类物质、低聚糖等益生元等)都会影响双歧杆菌的肠道定殖。因此分离得到可以在肠道内定殖的双歧杆菌具有非常重要的应用价值和现实意义。

发明内容

本发明在针对现有技术不足，提供了一种新的双歧杆菌DD98，可进一步用于富硒培养，且具有良好的肠道定殖能力以及肠道保护和肝损伤保护功能。此外，为了避免双歧杆菌因环境敏感导致失去活性的问题，本发明提取了双歧杆菌DD98的活性成分，获得其水溶性蛋白，扩大了双歧杆菌DD98的应用。

本发明具体技术方案如下：

一种双歧杆菌，命名为双歧杆菌DD98，其16SrDNA核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。