[发明专利]有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜用于植物组织荧光显微分析的方法

权利要求书

1.一种植物组织荧光显微成像分析方法，其特征是，使用有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜；所述的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜，二氧化硅与有机聚合物的质量比为(0.005-0.5):1；

步骤如下：

(1)取植物组织，置于培养液中室温下浸泡5-10h；培养液为浓度为0.1-1mg/mL；

(2)将浸泡过的植物组织用纱布包好，并转移至培养皿中，将培养皿转移至20-35℃的恒温箱中，恒温箱相对湿度保持为50-70％；定期用培养液使纱布保持湿润，培养植物组织2-7天；

(3)取步骤(2)培养的植物组织，切片，进行LSCM观测。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养液为有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜水溶液。

3.如权利要求2所述的植物组织荧光显微成像分析方法，其特征是，以0.1-1mg/mL的复合纳米膜水溶液培养生物组织。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，浓度为0.005mg/mL的复合纳米膜水溶液，在240-400nm波长激发下，其发射峰位于437±4nm，相对量子产率为74-81％。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，一种有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜，采用下列制备方法制备：

1)获得具有荧光特性的有机聚合物粉体；

2)将步骤1)中所述有机聚合物粉体在超声辅助下溶解于蒸馏水中，获得具有荧光特性的有机聚合物纳米膜水溶液A；

3)往步骤2)所得A溶液中加入有机硅的乙醇溶液；室温下搅拌反应4-12h，得混合液B；所述的有机硅，其水解后产生的二氧化硅与步骤1)所述有机聚合物粉体的质量比为(0.005-0.5):1；

4)将步骤3)所得混合液B冷冻干燥，获得具有荧光特性的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜粉体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的有机聚合物粉体的制备，包括下列步骤：

a.将柠檬酸与半胱氨酸混合、研磨，得混合物C；半胱氨酸，为L-半胱氨酸或D-半胱氨酸；所述步骤a中的柠檬酸与半胱氨酸，其物质的量之比为2:1；

b.将混合物C转移至容器D中，将容器D置于可控温加热炉中160℃加热1h，将容器D从加热炉中取出，置于室温环境中冷却，得有机聚合物粉体；所述容器，其材质为不锈钢、玻璃或陶瓷；所述步骤b中的混合物C与容器D，混合物C的体积不超过占容器D容积的50％。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的有机聚合物粉体溶解于蒸馏水，其聚合物浓度为1mg/mL；步骤2)所述的超声辅助，其超声功率为100W，超声时长为5min；

步骤3)所述的有机硅，为正硅酸乙酯、二甲基二甲氧基硅烷、3-(2,3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷、辛基三乙氧基硅烷、十七氟癸基三乙氧基硅烷、十二烷基三乙氧基硅烷其中的一种或它们之间的组合；

步骤3)所述的乙醇溶液，其中，乙醇溶液的体积与步骤2)中所述蒸馏水的体积比为1:(1-9)；

步骤3)所述的搅拌，搅拌方式为磁力搅拌或机械搅拌，搅拌速率为100-300转/分。

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤4)所述的冷冻干燥，其冷冻温度为零下40-50℃，真空度小于200Pa。