[发明专利]有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜用于植物组织荧光显微分析的方法

说明书

本发明涉及一种植物组织荧光显微成像分析方法，尤其涉及使用有荧光的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜的荧光显微成像分析方法。一种植物组织荧光显微成像分析方法，使用有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜；以0.1‑1mg/mL的复合纳米膜水溶液培养生物组织。本发明所获得有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜，具有生物相容性，可用于生物组织的培养液，并可作为荧光指示剂，用于生物组织荧光显微成像。

技术领域

本发明涉及一种植物组织荧光显微成像分析方法，尤其涉及使用有荧光的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜的荧光显微成像分析方法。

背景技术

对植物组织进行观察实验，常使用切片观察法。切片观察虽然可以方便地观察植物组织的形态，但不可避免地会破坏植物组织，不适合活体分析。

具有生物相容性的碳基荧光材料在传感、细胞成像及癌症诊断与治疗领域有着重要的应用(Sensors and Actuators B:Chemical,242(2017)1210-1215；ACS appliedmaterialsinterfaces,7(2015)23231-23238；ACS nano,9(2015)11455-11461.)。如果用于活的生物体的荧光分析，荧光材料的浓度应当尽可能低；这就要求荧光材料在比较低的浓度下具有尽可能高的荧光强度和量子产率。但多数碳基荧光材料的相对量子产率不超过50％(ACS applied materialsinterfaces,7(2015)23231-23238；ACS nano,9(2015)11455-11461.)，因此限制了它们的应用。

寻找高的荧光强度和量子产率的荧光材料，尤其是具有生物相容性的碳基二维荧光材料，依然是一项本领域亟待解决的、富有挑战性的难题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种植物组织荧光显微成像分析方法，尤其是提供一种使用有荧光的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜的荧光显微成像分析方法。

一种植物组织荧光显微成像分析方法，使用有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜。

优选的，以0.1-1mg/mL的复合纳米膜水溶液培养生物组织。

优选的，所述植物组织为绿豆、黄豆、绿豆芽、黄豆芽等。

一种使用有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜的植物组织荧光显微分析方法，步骤如下：

(1)取植物组织，置于培养液中室温下浸泡5-10h；培养液为浓度为0.1-1mg/mL；

(2)将浸泡过的植物组织用纱布包好，并转移至培养皿中，将培养皿转移至20-35℃的恒温箱中，恒温箱相对湿度保持为50-70％；定期用培养液使纱布保持湿润，培养植物组织2-7天。

(3)取步骤(2)培养的植物组织，切片，进行激光扫描共聚焦显微观测。

所述培养液为有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜水溶液。

本发明所述的室温为室内的一般温度，一般为16-35℃，优选18-30℃。

所述的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜，二氧化硅与有机聚合物的质量为(0.005-0.5):1。浓度为0.005mg/mL的复合纳米膜水溶液，在240-400nm波长激发下，其发射峰位于437±4nm(即433-440nm)，相对量子产率为74-81％。

所述有机聚合物为柠檬酸与半胱氨酸混合研磨后于160℃加热炉中热处理1h所形成的聚合物。将有机聚合物粉体在超声辅助下溶解于水，有机聚合物分子在水溶液中能够自组装形成有机聚合物纳米膜，所获得的水溶液称为有机聚合物纳米膜水溶液。

一种有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜，采用下列制备方法制备：

1)获得具有荧光特性的有机聚合物粉体；