[发明专利]一种荆半夏组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明提供了一种荆半夏组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)培养基的配制；(2)外植体的选择；(3)诱导获得愈伤组织；(4)愈伤组织增殖培养；(5)愈伤组织分化培养；(6)加速培养；(7)壮苗培养；(8)炼苗移栽。本发明采用特制的培养基及通过对愈伤组织进行液体培养十天，体积和重量增大300％，愈伤组织质量较好；当固体培养基出现绿色芽点时，再次转入液体培养基时，经过十天培养，愈伤组织分化，出现大量根系和芽点，体积和重量明显增大；然后转移至固体培养基上，根系继续增长，芽点继续发育，形成大量叶片，15d即可形成完整的半夏植株，繁殖系数达到20以上，生根率达95％以上，移栽成活率在99％以上。

技术领域

本发明涉及苗木无性繁殖技术领域，特别涉及一种荆半夏组织培养快速繁殖方法。

背景技术

半夏[Pinellia ternate(Thunb.)Breit.]属天南星科半夏属植物，以干燥块茎入药，是一种重要的中药材，半夏块茎含挥发油、烟碱、谷氨酸、谷甾醇等化学成分。具有降逆止吐、燥湿化痰、消痞散结等功能，多用于治疗痰喘咳、恶心呕吐、眩晕等。古之《神龙本草经》称半夏为守田、水玉，其为多年生草本植物，多为夏秋两季采挖，其块茎成圆球形或扁圆形，喜沙性土壤，是一味应用广泛、疗效确切的大宗传统中药材。原荆州尤江陵、潜江盛产，且品质优良，俗称“荆半夏”。因其品质优良、药效特佳而成为半夏入药首选。令人无奈的是，如今市场上供给的荆半夏越来越少，现时多用的半夏为“水半夏”，虽都有半夏之称，“水半夏”在上世纪八十年代却是属于查处、没收、罚款的药材，药性与荆半夏大不相同，药价有天壤之别。为什么曾经的被查处的“水半夏”如今能替代半夏大行其道呢？由于半夏药用和出口需求量大，造成野生资源日益枯竭难以满足要求，价格持续上扬，居高不下。目前，虽有人工栽培种植荆半夏可以缓解市场压力，但由于荆半夏生长要求阴湿环境，在灾害性天气较多的年份，会造成收获量不足的情况，这对荆半夏的生产造成极大限制。另外，半夏连作种植易导致病毒侵染，种性退后，产量和品质下降。因此，考虑使用植物组培快繁技术进行荆半夏种苗生产并进行人工种植是解决荆半夏资源短缺的有效途径。

对比文件1：申请号为“CN201410023655.0”，名称为“一种半夏一步成苗的组织培养方法以及新的半夏培养基”公开了一种半夏一步成苗的组织培养方法，以6-BA和NAA激素组合，对株芽、块茎、叶片和叶柄为外植体，进行一步成苗诱导，块茎分化效率最高，每块愈伤组织分化出12-14个小苗，成苗率95％。块茎成苗天数35-40d，叶片和叶柄需要2-3个月。然而该案存在愈伤组织增殖速度慢、器官分化效率低等显著不足的缺点。此外，该案在外植体选择上存在较多限制因素，块茎和株芽作为外植体存在消毒不彻底，污染率高的问题；且成苗时间过长，难以满足市场的需求。

对比文件2：申请号为“CN200510062339.5”，名称为“一种半夏脱毒组培快繁的方法”涉及一种半夏脱毒组培快繁的方法，以半夏未成熟的种子或成熟种子为外植体，经诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽，获得脱毒的组培苗、株芽以及小块根，繁殖系数为5-10倍。然而该繁殖系数仍有待提高，且并未对增值系数、增值效果做数据说明。

因而，如何开发一种荆半夏的快速培养方法，且提高其增值效率以及分化效率，以满足市场需求，成为亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了一种荆半夏组织培养快速繁殖方法，采用本发明所述的培养方法得到的荆半夏愈伤组织繁殖系数达到20以上，丛生芽健壮，接种到愈伤组织分化培养基以及加速培养基后容易生根，生根率可达95％以上，移栽成活率在99％以上，愈伤组织增殖速度快、质量好，培养分化、成苗所需时间短，可在短短的15天内即可形成完整的半夏植株，保障荆半夏苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足了生产上的需要。

本发明是这样实现的：

本发明提供一种荆半夏组织培养快速繁殖方法，具体包括如下步骤：

步骤1、培养基的配制：