[发明专利]一种林麝麝香产量性状的微卫星位点及其选择方法在审
申请号: | 201910030218.4 | 申请日: | 2019-01-14 |
公开(公告)号: | CN109536621A | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 杨营;张明;付文龙;蔡永华;郑程丽;朱苹 | 申请(专利权)人: | 四川养麝研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 苗艳荣 |
地址: | 611830 四川省成*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 麝香 微卫星位点 产量性状 位点 微卫星分子标记 多态性分析 步骤工艺 亲本个体 世代间隔 性状选择 育种进程 基因型 引物 高产 | ||
1.一种林麝麝香产量性状的微卫星位点,其特征在于,所述的微卫星位点为Mb116H或Mb43,其中位点Mb116H的NCBI编号为DQ852334,位点Mb43的NCBI编号为EF599347。
2.根据权利要求1所述的一种林麝麝香产量性状的微卫星位点,其特征在于,用于PCR扩增微卫星位点Mb116H的引物为SEQ ID NO.1~2,用于PCR扩增微卫星位点Mb43的引物为SEQ ID NO.3~4。
3.权利要求2所述的用于扩增微卫星位点Mb116H的引物,其特征在于,所述的引物如SEQ ID NO.1~2所示。
4.权利要求2所述的用于扩增微卫星位点Mb43的引物,其特征在于,所述的引物如SEQID NO.3~4所示。
5.一种林麝麝香产量性状早期微卫星分子标记选择方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)根据位点Mb116H或Mb43设计引物,并在每对引物的上游序列5’端添加HEX荧光标记;
2)提取林麝股动脉液基因组DNA,采用上述引物进行PCR扩增反应,取扩增产物于1.6%溴化乙锭染色的琼脂糖凝胶电泳检测;
3)利用PCR扩增产物,以ROX标记的等位基因Ladder为分型标准物,进行毛细管电泳,以等位基因分型标准物ROX分子量为标准确认等位基因型,Mb116H位点筛选出AE、BC、BD、BE、BI、BK、CC、CD、CE、CF、CK、DE、DI、EE、EF、EH、EJ和GH共18种基因型林麝个体;Mb43位点筛选出AA、AB、AE、AH、BB、BC、BE、BF、BH、CC、CE、CF、DD、DH、EE、EF、EG、EH和HH共19种基因型林麝个体;
4)Mb116H位点选留CF和BK基因型的个体作为雄性选择亲本,淘汰AE、BC、BD、BE、BI、CC、CD、CE、CK、DE、DI、EE、EF、EH、EJ和GH基因型的个体;在Mb43位点EE、DH和EF基因型的个体作为雄性选择亲本,淘汰AA、AB、AE、AH、BB、BC、BE、BF、BH、CC、CE、CF、DD、DH、EE、EF、EG、EH和HH基因型的个体。
6.根据权利要求5所述的一种林麝麝香产量性状微卫星分子标记选择方法,其特征在于,步骤(1)中所述的引物如SEQ ID NO.1~4所示。
7.根据权利要求5所述的一种林麝麝香产量性状微卫星分子标记选择方法,其特征在于,步骤(2)中PCR反应程序为:95℃预变性5min,94℃变性30s,退火50s,72℃延伸50s,35个循环;72℃延伸10min,4℃保存。
8.权利要求3或4所述的微卫星位点引物在分子标记辅助育种方面的应用。
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