[发明专利]一种林麝生长性状微卫星位点及早期选择方法

权利要求书

1.一种林麝生长性状微卫星位点，其特征在于，所述的微卫星位点为Mb18或Mb37，其中位点Mb18的NCBI编号为EF599337，位点Mb37的NCBI编号为EF599342。

2.根据权利要求1所述的一种林麝生长性状微卫星位点，其特征在于，用于PCR扩增微卫星位点Mb18的引物为SEQ ID NO.1～2，用于PCR扩增微卫星位点Mb37的引物为SEQ IDNO.3～4。

3.权利要求2所述的用于扩增微卫星位点Mb18的引物，其特征在于，所述的引物如SEQID NO.1～2所示。

4.权利要求2所述的用于扩增微卫星位点Mb37的引物，其特征在于，所述的引物如SEQID NO.3～4所示。

5.一种林麝生长性状微卫星分子标记选择方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)根据位点Mb18或Mb37设计引物，并在每对引物的上游序列5’端添加HEX荧光标记；

2)提取林麝股动脉液基因组DNA，采用上述引物进行PCR扩增反应，取扩增产物于1.6％溴化乙锭染色的琼脂糖凝胶电泳检测；

3)利用PCR扩增产物，以ROX标记的等位基因Ladder为分型标准物，进行毛细管电泳，以等位基因分型标准物ROX分子量为标准确认等位基因型，Mb18位点筛选出AA、AB和BB 3种基因型林麝个体；Mb37位点筛选出AA、AC、AD、AE、AF、AG、AH、AI、BI、CC、CE、CF、CI、DE、DH、DI、EE、EF、EG、EI和HI 21种基因型林麝个体；

4)Mb18位点选留AA基因型的个体作为雄性选择亲本，淘汰AB和BB基因型的个体，Mb37位点选留EE、DH与HI基因型的个体作为雄性选择亲本，淘汰AA、AC、AD、AE、AF、AG、AH、AI、BI、CC、CE、CF、CI、DE、DI、EF、EG和EI基因型的个体。

6.根据权利要求5所述的一种林麝生长性状微卫星分子标记选择方法，其特征在于，步骤(1)中所述的引物如SEQ ID NO.1～4所示。

7.根据权利要求5所述的一种林麝生长性状微卫星分子标记选择方法，其特征在于，步骤(2)中PCR反应体系为25μL：10×buffer15μL、1.2μL的25mmol/L Mg²⁺、2mmol/L dNTPs各1μL、10μmol/L上下游引物各1μL、模板DNA 1μL、Tap DNA聚合酶(Promega)1U，ddH₂O 4.8μL。

8.根据权利要求5所述的一种林麝生长性状微卫星分子标记选择方法，其特征在于，步骤(2)中PCR反应程序为：95℃预变性5min，94℃变性30s，退火50s，72℃延伸50s，35个循环；72℃延伸10min，4℃保存。