[发明专利]检测D二聚体的电化学试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测D二聚体的电化学试剂盒，其特征在于自下而上依次设有基座、电极层、上盖，其中基座上开设用于安装电极的限位槽，所述限位槽的轮廓为具有一个缺口的圆环形；所述电极层呈一端具有圆形膨大部的长条状，圆形膨大部的外径小于等于基座上限位槽的内径，条形部的宽度小于等于限位槽的缺口宽度，所述电极层设有PET基层，PET基层上设置工作电极、参比电极和对电极，其中工作电极为圆形且位于圆形膨大部的中心，参比电极和对电极为等径的弧形，参比电极和对电极设置在工作电极外侧，工作电极、参比电极、对电极分别经银导线向外输出信号且位于条形部的PET基层上；所述上盖上开设样品加样孔，样品加样孔的下侧沿样品加样孔设置环形凸台，且环形凸台的下端面上开设与限位槽相嵌合的卡槽，上盖的样品加样孔经卡槽与基座上的限位槽嵌合；所述工作电极上修饰D二聚体抗体。

2.根据权利要求1所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒，其特征在于基座呈条形，限位槽设置在基座的一端，基座的另一端设置检测插口，电极层的条形部的末端与检测插口相连，上盖也呈条形，基座内壁和上盖内壁对应设有相配合的扣槽和卡扣，便于上盖与基座扣合为一体。

3.根据权利要求1所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒，其特征在于所述电极层的PET基层厚度为0.3mm，工作电极通过丝网印刷印刷配置，工作电极的直径为3mm，银导线以及对电极、参比电极带宽为1mm。

4.根据权利要求1所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒，其特征在于所述电极层的条形部的宽度为7mm，使用时将样品溶液滴入样品加样孔，由于上盖上样品加样孔的下侧沿样品加样孔设置环形凸台，且环形凸台的下端面上开设与限位槽相嵌合的卡槽，上盖与基座能够将样品限制在电极层对应的圆形区域内。

5.根据权利要求1所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒，其特征在于所述基座中限位槽内的圆形区域具有外凸的上表面。

6.一种如权利要求1-5中任意一项所述检测D二聚体的电化学试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤1：工作电极的制备，通过丝网印刷烘干之后，分别在超纯水、乙醇、超纯水中，对印刷电极进行超声清洗后；氮气吹干，备用；

步骤2：配制含有0.01-0.05M 3,4-乙烯二氧噻吩EDOT和1.0mg/mL-5.0mg/mL聚苯乙烯磺酸钠pss的均一水溶液，采用循环伏安法法CV对步骤1得到的工作电极进行电沉积，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗工作电极表面；

步骤3：再配制含有1mM氯金酸和0.5M氯化钠NaCl的均一水溶液，采用循环伏安法CV对步骤2中产品进行电沉积，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗电极表面；

步骤4：滴加15μL 15mg/ml的D-Dimer-L抗体于步骤3制备的工作电极上，用超纯水冲洗干净，制得一种检测D-二聚体的印刷电极传感器。

7.根据权利要求6所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒的制备方法，其特征在于步骤2中EDOT材料的电沉积包括如下步骤：中工作电极的基底材料采用金纳米颗粒与3,4乙烯二氧噻吩(EDOT)纳米复合物，制备方法如下：

步骤2-1：将0.01g聚苯乙烯磺酸钠(pss)溶于5mL超纯水中，加入10μL EDOT单体，超声15min使其分散为均一水溶液；

步骤2-2：将印刷后的工作电极浸入均一水溶液中，在-0.2～1.2V的电压范围采用循环伏安法沉积5-20圈，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗电极表面。

8.根据权利要求6所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒的制备方法，其特征在于步骤3中将0.117gNaCl溶于3800μL的超纯水中，加入200μL 20mM氯金酸溶液，玻璃棒搅拌使其形成均一溶液；将步骤2所得印刷电极即工作电极浸入均一溶液中在-1.5～0.5V的电压范围采用循环伏安法沉积1-10圈，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗电极表面。

9.根据权利要求6所述的一种检测D二聚体的电化学试剂盒，其特征在于包括以下步骤：

步骤1：工作电极的制备，通过丝网印刷烘干之后，分别在超纯水、乙醇、超纯水中，对抛光的印刷电极进行超声清洗后；氮气吹干，备用；

步骤2：配制含有0.02M 3,4-乙烯二氧噻吩EDOT和2.0mg/mL聚苯乙烯磺酸钠pss的均一水溶液，采用循环伏安法法CV对步骤1得到的工作电极进行电沉积，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗工作电极表面；

步骤3：再配制含有1mM氯金酸和0.5M氯化钠NaCl的均一水溶液，采用循环伏安法CV对步骤2中产品进行电沉积，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗电极表面；

步骤4：滴加15μL 15mg/ml的D-Dimer-L抗体于步骤3制备的工作电极上，室温下孵育8h，用超纯水冲洗干净，制得一种检测D-二聚体的印刷电极传感器；

其中步骤2中工作电极的基底材料采用金纳米颗粒与3,4乙烯二氧噻吩(EDOT)纳米复合物，电沉积处理如下：

步骤2-1：将0.01g聚苯乙烯磺酸钠(pss)溶于5mL超纯水中，加入10μL EDOT单体，超声15min使其分散为均一水溶液；

步骤2-2：将印刷后的工作电极浸入上述均一溶液中，在-0.2～1.2V的电压范围采用循环伏安法沉积15圈，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗电极表面；

所述步骤3中电沉积处理如下：将0.117gNaCl溶于3800μL的超纯水中，加入200μL 20mM氯金酸溶液，玻璃棒搅拌使其形成均一溶液；将印刷电极即工作电极浸入均一溶液中在-1.5～0.5V的电压范围采用循环伏安法沉积2圈，电沉积成功之后，用超纯水彻底清洗电极表面。