[发明专利]重组人永生化角质形成细胞系及其制备方法在审
| 申请号： | 201910043398.X | 申请日： | 2019-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN109517801A | 公开（公告）日： | 2019-03-26 |
| 发明（设计）人： | 陈虹;王春仁;韩倩倩;付步芳;许建霞;王涵 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/53;C12N15/85;C12N15/66;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 永生化 角质形成细胞系 制备 角质形成细胞 编码荧光 致敏 筛选 基因 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备重组人永生化角质形成细胞系的方法，为向人永生化角质形成细胞导入特异DNA分子，获得重组人永生化角质形成细胞系；所述特异DNA分子从5’末端向3’末端依次包括抗氧化反应元件、启动子和编码荧光酶的基因。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述人永生化角质形成细胞为HaCaT细胞。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述抗氧化反应元件为ARE元件。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述ARE元件的核苷酸序列如序列表中序列1所示。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述启动子为SV40启动子。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述SV40启动子的核苷酸序列如序列表中序列3所示。
7.如权利要求1至6任一所述的方法，其特征在于：所述“向人永生化角质形成细胞导入特异DNA分子”通过向人永生化角质形成细胞导入重组载体实现；所述重组载体含有所述特异DNA分子。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述重组载体为将载体pGL4.17的限制性内切酶KpnI和HindⅢ识别序列间的片段替换为序列表中序列2所示的双链DNA分子，得到的重组质粒。
9.采用权利要求1至8任一所述方法制备的重组人永生化角质形成细胞系。
10.权利要求9所述重组人永生化角质形成细胞系在筛选致敏化合物中的应用。
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