[发明专利]靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

1)载多糖长循环热敏脂质体的制备

将二棕榈酰磷酯酰胆碱、单棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素加入有机溶剂中，得磷脂材料溶液A；将多糖类物质的水溶液加入到磷脂材料溶液A中后超声乳化，得到乳化液，将乳化液加入水中后超声乳化，得到W/O/W型复乳，除去该复乳中的有机溶剂，得到脂质体混悬液，将脂质体混悬液用水稀释后依次经微孔滤膜过滤、磷酸盐缓冲液透析，得到含有载多糖长循环热敏脂质体的溶液；所述多糖类物质为树舌多糖；

所述步骤1)中，二棕榈酰磷酯酰胆碱:单棕榈酰磷脂酰胆碱:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇:二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素的质量比为(30～35):(3～5):(2～5):(2～5)，多糖类物质的水溶液是将2～10mg的多糖类物质溶于1～5mL水而制成的，多糖类物质和磷脂材料的质量比为1:5～20；超声乳化的条件为：超声功率为80～150W，超声时间为2～10min，乳化温度为0～4℃；乳化液的有机相:水相的体积比为1～4:1，所述复乳的水相:有机相:水相的体积比为1:(1～4):5；微孔滤膜的孔径为0.2～0.8微米；透析的条件为：透析袋截留分子量为8000～50000Da，透析液每4～8h换液一次，透析24～36小时；

2)微泡的制备

将二棕榈酰磷酯酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素加入有机溶剂中，得到磷脂材料溶液B，通过蒸发除去磷脂材料溶液B中的有机溶剂，得到薄膜状物质，将薄膜状物质真空干燥后与由Tris-HCl、甘油及丙二醇组成的液体介质混合，然后依次经全氟丙烷置换空气、机械振动，得到白色浑浊状微泡分散体系，机械振动采用银汞调和振荡器，功率为30～50W，时间为30～60s；向该分散体系中加入磷酸盐缓冲液后通过离心除去未配合的磷脂材料，得到生物素化的微泡的溶液，全氟丙烷微泡的平均粒径为630±18nm；

所述步骤2)中，二棕榈酰磷酯酰胆碱质量为36mg，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇质量为2mg，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-生物素质量为2mg；

3)载多糖长循环热敏脂质体-微泡复合物的制备

向生物素化的微泡的溶液中加入亲和素后振摇混匀，然后再加入含有载多糖长循环热敏脂质体的溶液并进行孵育，使得所述微泡及载多糖长循环热敏脂质体表面的生物素通过亲和素进行连接，得到载多糖长循环热敏脂质体-微泡复合物；

所述步骤3)中，孵育条件为：转速为100～150r/min，时间为10～20min，温度为20～25℃。

2.根据权利要求1所述一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，液体介质中Tris-HCl:甘油:丙二醇的体积比为(70～90):(10～30):(10～30)，其中，Tris-HCl选自pH 7.4～8的0.1～0.3M Tris-HCl。

3.根据权利要求1所述一种靶向温控载多糖长循环脂质体-微泡复合物递药系统的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，蒸发采用旋转蒸发仪，旋蒸温度为20～40℃；真空干燥的温度为20～35℃，时间为12～24h；离心的转速为1250～3500r/min。