[发明专利]猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用有效
申请号: | 201910046124.6 | 申请日: | 2019-01-18 |
公开(公告)号: | CN109762052B | 公开(公告)日: | 2022-03-08 |
发明(设计)人: | 白娟;李勇;姜辰龙;姜平;周而璇 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C07K14/01 | 分类号: | C07K14/01;C12N15/34;C12N15/63;G01N33/68;C07K16/08 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 贾波 |
地址: | 210014 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 圆环 病毒 cap 重组 蛋白 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白的编码基因,其特征是:将PCV3 ORF2基因中表达第1-120位氨基酸的基因片段删除而得,该基因的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种重组质粒,其特征是:由权利要求1所述的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白的编码基因和载体重组而得。
3.一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白,其特征是:由权利要求2所述的重组质粒表达而得。
4.根据权利要求3所述的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白,其特征是:所述猪圆环病毒3型Cap重组蛋白通过将权利要求2所述的重组质粒转化至Rosseta感受态细胞,然后IPTG诱导表达而得。
5.根据权利要求3所述的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白,其特征是:其氨基酸序列如SEQID NO.3所示。
6.一种PCV3猪多克隆抗体,其特征是按照下述方法制得:
(1)以纯化的权利要求3、4或5所述的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白为抗原,用其对猪进行免疫,每隔3周加强免疫一次;
(2)待猪血清中抗体的效价大于1:10000时取猪血,分离血清,将血清离心后取上清液,即为PCV3猪多克隆抗体。
7.根据权利要求6所述的PCV3猪多克隆抗体,其特征是:将纯化的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白先用PBS稀释成2 mg/mL,然后与等体积的ISA-206佐剂混合后充分乳化,然后再对猪进行免疫。
8.根据权利要求6所述的PCV3猪多克隆抗体,其特征是:每头猪的免疫剂量为1mg猪圆环病毒3型Cap重组蛋白。
9.一种PCV3 间接ELISA抗体检测试剂盒,其特征是:包括包被权利要求3、4或5所述的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白的酶标板。
10.一种PCV3 的间接ELISA抗体检测方法,其特征是:包括采用纯化的权利要求3、4或5所述的猪圆环病毒3型Cap重组蛋白包被酶标板的步骤,该检测方法以非疾病的诊断和治疗为目的。
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