[发明专利]一种透明质酸的衍生物及其制备方法与应用

说明书

本发明属于医药技术领域，尤其是一种透明质酸的衍生物及其制备方法与应用，以透明质酸为母体骨架，用脂肪醇对透明质酸进行修饰，制得具有两亲性的透明质酸衍生物，在此基础上，对其进行二硫键与mPEG的修饰，使其具有肿瘤靶向、长循环、还原敏感性释药的特征，将其用作为抗肿瘤类药物载体时，可实现药物在肿瘤部位的定向、精准释放、达到增效减毒的效果；还可作为止血海绵，用于创面的止血，同时具有良好的生物相容性与生物可降解性，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于医药技术领域，尤其是一种透明质酸的衍生物及其制备方法与应用。

背景技术

透明质酸作为一种天然存在的线性大分子黏多糖，由葡萄糖醛酸和N～乙酰葡萄糖的双糖单元反复交替连接而成，广泛分布于人体各个部位，具有无毒性、无免疫原性、良好的生物相容性和生物可降解性等优点；HA结构中含有羟基、羧基、乙酰氨基等活性基团，易于通过化学改性，制备得到相应的衍生物；此外，HA结合受体，如CD44 和RHAMM，在许多肿瘤细胞中过表达，HA及其衍生物可作为优良的药物载体，广泛用于肿瘤的靶向治疗，在医药领域中具有广泛的应用。

HA还具有良好的吸液止血和促进伤口愈合而用途广泛，特别是在生物材料领域具有广泛的开发前景；但是纯的HA由于其本身的一些缺陷而不能达到预期的药物载体的作用以及止血效果；透明质酸含有大量的羟基和羧基等基团，若对其进行适当的化学修饰，能更好的扬长避短，使HA得到更广泛应用；透明质酸具有良好的水溶性，对其进行疏水性修饰，则得到两亲性聚合物，其具有自组装形成胶束的能力，可作为药物的载体，将疏水性药物包载于胶束的疏水性内核中，增强药物的溶解性，并延长其生物半衰期，同时可通过增强的渗透和滞留效应，被动靶向于肿瘤部位。

聚乙二醇单甲醚(mPEG)具有良好的水溶性和生物相容性， mPEG修饰是近年来迅速发展起来的一项新技术，材料经过mPEG修饰后，通常具有水溶性增加，循环半衰期延长，与组织的相容性良好，毒副作用、刺激性降低等优点。

通过二硫键桥连的聚合物可以在谷胱甘肽存在的条件下发生断裂，从而将包载在其中的药物释放出来，与正常细胞相比，肿瘤细胞中谷胱甘肽的水平升高，这就为载药体系在肿瘤部位定向精准释放提供了可行性；基于此，提供二硫键交联的聚合物作为药物载体被广泛的研究。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供了一种透明质酸的衍生物，其分子结构式为：

该衍生物采用HA、脂肪醇、含二硫键的交联剂和mPEG反应制备而成。

上述透明质酸的衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)透明质酸修饰：将HA溶于反应溶剂中，以EDC和NHS 为活化剂，在20～80℃条件下活化12～96h，再加入脂肪醇，在20～80℃条件下搅拌12～96h，反应产物经透析纯化、冷冻干燥处理后，得透明质酸-脂肪醇衍生物；

(2)二硫键连接mPEG的合成：将含二硫键的交联剂溶于反应溶剂中，以EDC和NHS为活化剂，在20～80℃条件下活化12～96h，再加入mPEG，在20～80℃条件下搅拌12～96h，再向其中加入过量冰乙醚，离心，收集产物，干燥，得到二硫键连接的mPEG；

(3)脂肪醇-透明质酸-二硫键-mPEG的合成：将二硫键连接的mPEG溶于反应溶剂中，以EDC和NHS为活化剂，在20～80℃条件下活化12～96h；再加入透明质酸-脂肪醇衍生物，在20～80℃条件下搅拌12～96h，收集产物；产物经过透析纯化、冷冻干燥，得到脂肪醇-透明质酸-二硫键-mPEG。

所述HA的平均分子量为5～500kDa。

所述脂肪醇包括但不限于十四醇、十六醇或十八醇。

所述含二硫键的交联剂包括但不限于二硫代二丙酸或胱胺。