[发明专利]草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法

权利要求书

1.一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，以草莓连作后的根际鲜土壤为提取、分离纯化原料，其特征是包括如下步骤：

1)、除杂、过筛，将提取的草莓连作后的根际鲜土壤原料，经剔除根茬残体及其余杂物质，经粉碎、过筛，为除杂土；

2)、加碱离心静置，将1）步制备的除杂土置于离心装置中，并加入碱水溶液，并离心搅拌静置，得上清液为静置碱性溶液；

3）、酸化处理，将2）步制得的静置碱性溶液先进行震荡处理、然后加入酸溶液进行酸化处理，至溶液pH为2-3.5，得酸化处理液；

4）、精密过滤制分离提取样品液、将3）步制得的酸化处理液，用精密过滤器过滤制得分离提取样品液；

5）、将4）步制备的分离提取样品液使用液相柱采用高效液相色谱法进行草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化，测得到草莓连作障碍酚酸类物质。

2.根据权利要求1所述的一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，其特征是步骤1)所述过筛是过30-50目筛。

3.根据权利要求1所述的一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，其特征是步骤2）加入碱水溶液是加NaOH溶液，控制NaOH溶液的浓度为0.8-1.5 mol·L^-1；所述静置是控制静置时间为20-30小时。

4.根据权利要求1所述的一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，其特征是步骤3）酸化处理是将静置碱性溶液，经震荡处理后，置于离心装置中，加入盐酸溶液，然后再离心处理，控制盐酸溶液浓度为10-13 mol·L^-1，控制离心处理过程中的离心转速为3500-4300 r·min^-1，控制离心处理时间8-15 min，酸化处理时间为1.5-2.5h，控制酸化处理至酸化处理液的pH为2.5-3时为终点，得酸化处理液。

5.根据权利要求1所述的一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，其特征是步骤4）所述精密过滤制分离提取样品液的过程中还包括萃取，所述萃取，是向步骤3）酸化处理液加入乙酸乙酯萃取若干次，合并萃取液，萃取渣经烘干处理后，再用乙醇和/或甲醇液充分溶解后过滤得过滤液，和合并萃取液一同经精密过滤器过滤制得分离提取样品液。

6.根据权利要求1所述的一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，其特征是步骤4）所述精密过滤是采用微孔滤膜滤过，控制微孔滤膜微孔直径为0.35-0.65 µm。

7.根据权利要求1所述的一种草莓连作障碍酚酸类物质提取、分离纯化的方法，其特征是步骤5）所述液相柱是为Kromasil C₁₈柱，其规格为4.6 mm×250 mm，5 μm；流动相为甲醇-水-乙酸=20：80：0.2；检测波长为250-280nm；柱温为22-28℃；控制流速为0.5-0.9 mL·min^-1；采用外标法定量分析峰面积。