[发明专利]五种来源于印度脚骨脆枝中抗癌活性化合物

说明书

本发明涉及印度脚骨脆枝中五个新的二萜（1‑5）类化合物的结构、制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用，所述的新化合物1‑5，结构见附图24。本发明的五个新化合物具有细胞毒活性。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及印度脚骨脆枝中新的二萜类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

细胞增殖是肿瘤发生发展的关键环节，目前临床上用于抗癌的药物大多是通过干扰或阻断肿瘤细胞的增殖来产生细胞毒性从而发挥作用的。细胞增殖的实现必须保证细胞能够进行完整的周期循环，一个完整的细胞周期包括分裂间期和分裂期，其中，分裂间期包括G1期、S期和G2期，药物可能作用于这三个时期中的任何一个时期来阻滞细胞周期，从而诱导细胞发生凋亡。

植物作为丰富的天然产物资源库为我们提供了许多可能的先导化合物，为了寻找新的高效抗肿瘤化合物，我们建立了人肺癌细胞A549、人慢性髓系白血病细胞K562及人肝癌细胞HepG2细胞筛选模型，在细胞对数生长期加入不同浓度的受试药物，处理一定时间后加入MTT测定光密度值来评判化合物细胞毒性，从而筛选出有较强细胞毒活性的化合物并确定对其最敏感的细胞株，最终发现可能的抗癌药物。

发明内容

本发明的目的在于提供印度脚骨脆中5个新的二萜类化合物及其制备方法和应用。

本发明提供的新化合物1-5属于克罗烷型二萜，其结构见附图24。

本发明还提供了所述新化合物1-5的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）印度脚骨脆（Casearia kurzii）枝用溶剂提取，回收提取液得粗提物；

（2）步骤（1）所得粗提物溶解于水中，采用与水不相混溶的有机溶剂萃取，回收溶剂得到萃取物；

（3）步骤（2）所得萃取物经硅胶柱色谱法分离，以石油醚/丙酮或石油醚/乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱；

（4）上述步骤（3）中所得流份经MPLC（中压液相色谱, 色谱填料为ODS）分离，以甲醇/水，或乙腈/水混合溶剂为流动相梯度洗脱；

（5）上述步骤（4）中所得流份经HPLC-RI（高效液相-示差检测）色谱分离，以甲醇/水为流动相洗脱，或以乙腈/水为流动相梯度洗脱，得到化合物1-5。

本发明提供的新化合物1-5的制备方法，所述印度脚骨脆为大风子科(Flacourtiaceae)脚骨脆属印度脚骨脆(Casearia kurzii)枝的提取物。

本发明提供的新化合物1-5的制备方法，步骤（1）所述的提取方法为加热回流提取或超声提取，所用溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙醇中的至少一种，药材：溶剂的重量体积比为1:5～1:15。

本发明提供的新化合物1-5的制备方法，步骤（2）所述的萃取方法，所用有机溶剂为石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯中的任意一种，水溶液和有机溶剂体积比1:1~1:2。

本发明提供的新化合物1-5的制备方法，步骤（3）中，洗脱溶剂为石油醚/丙酮或石油醚/乙酸乙酯混合溶剂，其比例为100:2～100:40。

本发明提供的新化合物1-5的制备方法，步骤（4）中，所述甲醇/水混合溶剂的比例为6:4～9:1，优选7:3～8:2，或乙腈/水混合溶剂比例为6:4~8:1，优选7:3～8:2。

本发明提供的新化合物1-5的制备方法，步骤（5）中所述流动相甲醇和水混合溶剂、或乙腈和水混合溶剂的体积比例为3:7～9:1，优选7:3～9:1。

本发明提供的五个新的萜类化合物具有细胞毒活性，可用于开发抗肿瘤药物。

附图说明