[发明专利]复合型脱细胞真皮基质生物敷料及其制备方法

权利要求书

1.一种复合型脱细胞真皮基质生物敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将皮肤样品浸泡于脱脂剂中超声处理脱脂，得脱脂皮肤；所述脱脂剂为：18wt%~22wt%脂肪醇聚氧乙烯醚、13wt%~17wt%壬基酚聚氧乙烯醚和4wt%~6wt%十二烷基磺酸钠的混合液，所述脱脂剂中：18wt%~22wt%脂肪醇聚氧乙烯醚、13wt%~17wt%壬基酚聚氧乙烯醚和4wt%~6wt%十二烷基磺酸钠以体积比为1:（1~5）:（1~3）混合；

（2）脱细胞：将脱脂皮肤反复冻融后，置于复合酶溶液中孵育过夜，得脱细胞皮肤；

（3）将所述脱细胞皮肤浸渍于混合溶液中；滴加氧化海藻酸钠溶液进行交联，即得；所述的混合溶液为：体积比为1:（2~8）：（2~5）：（1~5）:（3~6）的4wt%~6wt%羧甲基壳聚糖、10wt%~20wt%透明质酸、5wt%~10wt%羟乙基纤维素、1 wt%~5 wt%氯化钙和5wt%~7wt%硫酸角质素。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述将皮肤样品浸泡于脱脂剂中超声处理脱脂的时间为3~5h。

3.根据权利要求1~2任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述的滴加氧化海藻酸钠溶液进行交联为：滴加10wt%~25wt%氧化海藻酸钠进行交联，交联20~60min；和/或

步骤（3）所述的滴加的氧化海藻酸钠溶液与所述混合溶液的体积比为（1~3）：50。

4.根据权利要求1~2任一项所述的制备方法，其特征在于，所述脱脂皮肤反复冻融后，置于复合酶溶液中孵育过夜为：从-80℃到37℃反复冻融2~4次后，置于 4℃于复合酶溶液中孵育过夜。

5.根据权利要求1~2任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述复合酶溶液为：2.5 wt%~3.5wt%Dispase与0.2wt%~0.3 wt%trypsin-EDTA以体积比1:（2~5）混合得到；和/或步骤（2）所述的复合酶溶液中孵育过夜后，还包括以下步骤：

加入含有血清的DMEM培养基终止消化；

将脱细胞样品置于抗生素溶液浸泡4~6分钟，PBS浸泡8~12分钟，重复 3~5 次。

6.一种复合型脱细胞真皮基质生物敷料，其特征在于，由如权利要求1~5任一项所述的生物敷料的制备方法制备得到。

7.如权利要求6所述的复合型脱细胞真皮基质生物敷料在制备促进皮肤愈合的生物敷料中的应用。