[发明专利]一种三疣梭子蟹WNT4基因及其应用

说明书

本发明涉及一种三疣梭子蟹WNT4基因及应用，涉及三疣梭子蟹基因工程，该三疣梭子蟹WNT4基因基因序列如SEQ NO.1所示，本发明还提供一种制备三疣梭子蟹三疣梭子蟹WNT4基因重组蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)构建三疣梭子蟹WNT4基因重组表达载体；(2)将步骤(1)所得重组表达载体导入宿主细胞，并将宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；(3)将分离纯化步骤(2)所得的表达产物，获得重组蛋白；与现有技术相比，本发明具有如下优点：三疣梭子蟹WNT4基因可能广泛参与了三疣梭子蟹附肢再生的分子机制，Wnt信号传导的下游效应包括广泛的细胞反应，例如细胞命运决定，增殖和分化。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，尤其涉及一种三疣梭子蟹WNT4基因及其应用。

背景技术

断肢再生是动物肢体损坏、自然脱落或者自残之后全部或部分重新生成的现象,是动 物的-种自我保护机制，多种动物均存在断肢再生的现象，有研究表明蟹类在断肢后具有 较强的再生能力。三疣梭子蟹苗种培育、养殖、运输过程中存在因蟹互相攻击及其它物理 损伤造成的附肢断肢现象,影响了蟹的摄食和运动能力,且断肢处易发生感染,造成蟹的 成活率和养殖产量下降,经济损失巨大,因此断肢个体能否成功再生出附肢对提高三疣梭 子蟹存活率和经济效益具有重要作用。我们使用RNA测序来构建与三疣梭子蟹中肢体再 生相关的基因表达谱，这是蟹附肢再生的第一个转录组研究我们的研究结果表明，WNT4及WNT信号通路参与三疣梭子蟹的肢体再生。Wnt信号传导首先被鉴定为其在癌发生中 的作用，但后来因其在胚胎中的功能而被认可发展。Wnt信号通过Wnt蛋白配体与α蛋白 的结合激活通路卷曲的受体，在细胞里它将生物信号传递给蛋白质。他们是高度进化的， 且人类和果蝇保守。关于节肢动物，果蝇含有7个Wnt基因，并且Wnt4基因的功能具有 最全面的研究。但在甲壳类动物，关于Wnt4基因的表达和功能知之甚少。

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种三疣梭子蟹的WNT4基因。

本发明所要解决的另一个技术问题是针对现有技术的现状提供一种三疣梭子蟹的 WNT4基因的应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：其特征在于：该三疣梭子蟹WNT4基因为PtWNT4，所述PtWNT4的核苷酸序列如SEQ NO.1所示。

所述的三疣梭子蟹WNT4基因的氨基酸序列为：