[发明专利]猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺

权利要求书

1.猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：

S1、酶解：将肠粘膜加入酶解罐中，加盐搅拌10分钟后加热至40-45℃，停止加热后搅拌10分钟，用氢氧化钠液调节pH值至7.2-7.5，再搅拌10分钟后加入2709蛋白酶，再搅拌十分钟后加热至56-58℃，继续搅拌30分钟后停止搅拌保温2小时，保温2小时后快速加热搅拌升温至85℃，温度升至85℃后缓慢加热至90-92℃，随后保温30-60分钟待酶解罐内液体分层，上层为蛋白质，下层为澄清的酶解液，分离蛋白质与酶解液，集中收集酶解液过滤；

S2、吸附：将步骤S1中收集的酶解液进行降温降盐度后，采用树脂进行吸附；

S3、洗涤：将步骤S2中吸附酶解液后的树脂用清水冲洗干净后，将树脂装入洗脱罐，在洗脱罐内加入5％的盐水清洗树脂后，沥干树脂；

S4、洗脱：用饱和盐水对步骤S3中沥干后的树脂进行重复洗脱，洗脱后收集洗脱液；

S5、沉淀：用乙醇沉淀步骤S4中的洗脱液；

S6、干燥：干燥步骤S5中洗脱液的沉淀物，获得肝素钠粗品，所述沉淀物为肝素钠。

2.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，肠粘膜与2709蛋白酶的重量之比为：200-300：1。

3.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S1中的酶解包括以下步骤：将肠粘膜加入酶解罐中，加占肠粘膜重量3.5％的盐搅拌10分钟后蒸汽直冲加热至45℃，停止加热后搅拌10分钟，用氢氧化钠调节pH值至7.2-7.5，再搅拌10分钟后加入2709蛋白酶，再搅拌十分钟后开蒸汽直冲加热至58℃，继续搅拌30分钟后停止搅拌保温2小时，保温2小时后用蒸汽直冲加热及蒸汽盘管加热混合加热方式快速加热至85℃，温度升高至85℃后关闭蒸汽直冲加热，采用蒸汽盘管加热缓慢加热至92℃，随后保温60分钟待酶解罐内液体分层，上层为蛋白质，下层为澄清的酶解液，分离蛋白质与酶解液，集中收集酶解液过滤。

4.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S2中吸附包括以下步骤：将步骤S1中收集的酶解液用马槽过滤方式过滤其中的蛋白液后，用清水将酶解液的温度降至60℃，将酶解液的盐度降至1.8波美度，随后采用树脂进行吸附。

5.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S2中吸附方式为动态吸附。

6.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S5中用于洗脱液沉淀的乙醇重量为洗脱液的1.5倍。

7.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S6中干燥包括以下步骤：用95％的酒精对步骤S5中洗脱液的沉淀物进行脱水处理，脱水处理后用绸布过滤，真空抽干后再放入烘箱低温烘干获得肝素钠粗品。

8.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S2中树脂的加量按照每根猪小肠加入20-30g树脂的比例添加。

9.根据权利要求1所述的猪小肠粘膜的肝素钠生产工艺，其特征在于，步骤S4中用饱和盐水对步骤S3中沥干后的树脂重复洗脱2-3次，每次洗脱3-4小时。