[发明专利]基于LC-MS技术同时测定中药制剂中多种成分含量的方法

权利要求书

1.一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，建立LC-MS MRM分离和同时含量测定方法，测定天龙通络胶囊中31种主要成分，该测定方法包括如下步骤：

(1)对天龙通络胶囊进行提取，提取方式包括但不限于加热提取、超声提取、索氏提取；提取溶剂类型包括但不限于甲醇、乙醇、水、不同比例的甲醇-水和不同比例的乙醇-水；料液比、提取温度、提取时间根据待测样品考察优化；

(2)将天龙通络胶囊样品溶液进行高效液相色谱(HPLC)分离，样品溶液进行进样前处理，所述处理方式选自高速离心或滤膜过滤方式中的一种；色谱柱采用C18为固定相；流动相A为0.1％甲酸-水(v/v)，流动相B相为乙腈，柱温25℃，流速为1.0mL/min，进样体积为5μL；梯度洗脱条件：0～5min，B为5％；5～13min，B为5％→7％；13～20min，B为7％→10％；20～30min，B为10％→22％；30～35min，B为22％→23％；35～41min，B为23％→24％；41～46min，B为24％→27％；46～59min，B为27％→60％；59～62min，B为60％→80％；62～70min，B为80％→100％；70～75min，B为100％；

(3)质谱(MS)并结合多反应监测(MRM)进行检测分析和31种成分的含量测定，其中31种成分及MS-MRM参数如下：

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2.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述的质谱(MS)并结合多反应监测(MRM)进行检测分析，其优化的质谱条件为：雾化压力35psig；毛细管电压，3500V；干燥气体流速：10L/min；干燥气体温度：350℃；定量采用多重反应监测(MRM)模式，监测化合物从母离子到某一特定子离子的裂解过程。

3.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)所述的多种成分的含量测定，选用合适的内标物作为内标，以进行多成分含量的同时、准确测定。

4.根据权利要求1所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，天龙通络胶囊的提取条件为50％乙醇-水超声提取30min，提取温度20℃，料液比1:320。

5.根据权利要求3所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，内标化合物更进一步优化，选择化合物性质稳定且出峰位置合适的甘草次酸和岩白菜素作为内标化合物，以满足制剂中不同类型成分的准确定量；内标化合物的终浓度均为83.33μg/mL。

6.根据权利要求5所述的一种基于液质联用(LC-MS)技术同时测定中药制剂中多种成分含量的测定方法，其特征在于，以甘草次酸为内标，定量牛磺胆酸，甘氨胆酸，胆酸，熊去氧胆酸，鹅去氧胆酸，甘氨脱氧胆酸和去氧胆酸7个胆酸类化合物；以岩白菜素为内标，定量水苏糖，牛磺酸，苹果酸，琥珀酸，天麻素，L-苯丙氨酸，丹参素，原儿茶酸，L-色氨酸，3,4-二羟基苯甲醛，4-羟基苯甲酸，巴利森苷E，绿原酸，香草酸，咖啡酸，4-羟基苯甲醛，巴利森苷B，阿魏酸，异绿原酸A，异绿原酸C，迷迭香酸，紫草酸，丹酚酸B和丹酚酸A其余24个化合物。