[发明专利]一种基于薄层色谱改进三七药材的鉴别方法

说明书

本发明提供一种基于薄层色谱改进三七药材的鉴别方法，该方法包括如下步骤：步骤1)取药材粉末0.5g,精密称定，置具塞锥形瓶中，加以水饱和的正丁醇20mL,密塞，超声，过滤，滤液加40mL以正丁醇饱和的水，摇匀，分层；取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；步骤2)另取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成对照品溶液；步骤3)照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各lμl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷‑无水乙醇‑水‑冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干；步骤4)喷显色剂加热至斑点显色淸晰。

技术领域

本发明属于三七药材的质量控制领域，具体涉及基于薄层色谱改进三七药材的鉴别方法。

背景技术

三七为五加科(Araliaceae)植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根及根茎，《中国药典》2015年版中有多种方法用于药材的质量控制。其中薄层鉴别为易于直观形象比较的彩色图谱鉴别，故而具有其独特的优势。

《中国药典》公开的三七药材鉴别方法为：取本品粉末0.5g,加水5滴，搅匀，再加以水饱和的正丁醇5mL,密塞，振摇10分钟，放置2小时，离心，取上清液，加3倍量以正丁醇饱和的水，摇匀，放置使分层(必要时离心)，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每lmL各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各lμl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸溶液(1→10),在105℃加热至斑点显色淸晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同的荧光斑点。

上述方法在做三七药材及含三七药材的中成药实验时出现样品及对照点未能分离的结果；多篇文献报道中国药典收载的色谱条件存在的一个长期未能解决的问题是未能将人参皂苷Re以及三七的特征成分三七皂苷R1分开。另外，《中国药典》公开的鉴别方法中的其中之一的展开剂三氯甲烷为易制毒化学品，且展开条件需在10℃以下，不易控制；另外显色剂硫酸溶液也不易挥发。

发明内容

基于以上技术问题，本发明提供一种安全性提高、提取时间缩短且解决了人参皂苷Re与三七皂苷R1无法分离问题的基于薄层色谱改进三七药材的鉴别方法，该方法包括如下步骤：

步骤1)取药材粉末0.5g,精密称定，置具塞锥形瓶中，加以水饱和的正丁醇20mL,密塞，超声，过滤，滤液加40mL以正丁醇饱和的水，摇匀，分层；取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；

步骤2)另取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1mL各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；

步骤3)照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各lμl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-无水乙醇-水-冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干；

步骤4)喷显色剂，加热至斑点显色淸晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光(365nm)下检视，显相同的荧光斑点。

本发明采用二氯甲烷系统替代三氯甲烷系统，而二氯甲烷是甲烷氯化物中毒性最小的，可提高人员安全性，另改变样品处理方法可有效缩短提取时间，提高效率，且改进后的方法有效而方便地解决了人参皂苷Re与三七皂苷R1分离的难题。

进一步优选地，所述步骤3)中展开剂中二氯甲烷、无水乙醇、水、冰乙酸的体积比例为14:9:1:0.5。