[发明专利]一种不含氯离子Nisin盐及其制备与应用有效

专利信息
申请号: 201910073494.9 申请日: 2019-01-25
公开(公告)号: CN110054669B 公开(公告)日: 2021-08-24
发明(设计)人: 陈小龙;张辉;江瑞妮;陆跃乐;朱林江;范永仙;陈翰驰 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C07K14/315 分类号: C07K14/315;C07K1/18;C07K1/34;A23L3/358
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;李世玉
地址: 310014 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 氯离子 nisin 及其 制备 应用
【说明书】:

发明公开了一种不含氯离子的Nisin盐及其制备与应用,所述不含氯离子Nisin盐按如下方法制备:将弱酸性离子交换树脂用纯水a洗至pH=8;再将乳酸链球菌素盐酸水溶液上样,依次用纯水b、酸水溶液洗脱,收集酸流出液,加入截留量为1000Da的超滤膜中,用纯水c进行过滤,滤液浓缩至干,获得不含氯离子Nisin盐;本发明提供的不含氯离子Nisin盐抑菌活性更高,比现有产品提高了28%,能够有效抑制和灭杀多种有害菌,可以应用于食品防腐领域,作为一种新的食品防腐剂。本发明操作简便,去除了Cl,Nisin盐纯度高达99%,适用于大规模的工业化生产,具有很高的经济价值。

(一)技术领域

本发明涉及一种乳酸链球菌素盐,特别涉及一种不含氯离子的Nisin盐及其制备方法与应用。

(二)背景技术

乳酸链球菌素(Nisin)是由部分乳酸链球菌(Lactococcus lactis)产生的一种细胞素,它能有效抑制引起食品腐败的嗜热脂肪芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、李斯特氏菌、肉毒梭杆菌等各种革兰氏阳性细菌的营养细胞和芽孢,并对人体安全无毒,因此广泛应用于食品行业,是一种高效、无毒、安全、无副作用的天然食品防腐剂。1990年3月29日将其纳入GB2760—86的1990年食品添加剂使用卫生标准增补品种中,可用于罐藏食品、植物蛋白食品、乳制品和肉制品。

乳酸链球菌素由34个氨基酸组成,分子量为3.5kDa,呈现阳离子和酸性特性,等电点约为9。目前,市场上的乳酸链球菌素为乳酸链球菌素盐酸盐和氯化钠的混合物,乳酸链球菌素与Clˉ结合,而乳酸链球菌素盐酸盐与硝酸、乙酸复配后的抑菌活性更高(刘丽莉,马美湖,杨协力.非生物性因素对乳酸链球菌素抗菌活性的影响[J].食品科学,2009,05):46-9.),即将乳酸链球菌素盐酸盐与硝酸、乙酸直接混合,得到的产品抑菌活性更高。但是乳酸链球菌素与酸的直接混合,不能去除与Nisin结合的Cl,产品中存在过量的酸根离子,成份不明确,同时后期工艺收得率低,单位成本高,影响了产品质量且对人体有毒害,使得产品难以被广泛应用到食品加工业。

(三)发明内容

本发明目的是为了解决乳酸链球菌与酸复配后存在过量游离酸,不能去除与Nisin结合的Clˉ的问题,提供了一种去除Clˉ制备Nisin盐的方法及应用。

本发明采用的技术方案是:

本发明提供了一种不含氯离子Nisin盐,所述不含氯离子Nisin盐按如下方法制备:将弱酸性离子交换树脂(优选先用1mol/L氢氧化钠水溶液以100mL/h速度洗脱再生)用纯水a洗至pH=8;再将乳酸链球菌素盐酸水溶液上样,依次用纯水b(优选洗脱3个柱体积)、酸水溶液洗脱,收集酸水溶液洗脱后的流出液,加入截留量为1000Da的超滤膜中,用纯水c(优选10倍流出液体积)进行过滤,滤液浓缩至干,获得不含氯离子Nisin盐;所述酸水溶液中酸为硝酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、柠檬酸、马来酸或山梨酸,优选硝酸、乙酸、山梨酸。所述纯水a、纯水b和纯水c均为纯水,为了便于区分不同步骤用量不同而命名,字母本身没有含义。

进一步,所述乳酸链球菌素盐酸水溶液是用0.02mol/L盐酸水溶液配成浓度为2-5mg/mL,所述乳酸链球菌素盐酸水溶液上样流速为50~175mL/h(即0.5~1.75BV/h,优选100mL/h),上样乳酸链球菌素盐酸水溶液中乳酸链球菌素的质量以弱酸性离子交换树脂体积计为0.1~5g/100mL。

进一步,所述酸水溶液的浓度为0.05~0.15mol/L(优选0.1mol/L),酸水溶液的洗脱速度为50~250mL/h(即0.5~2.5BV/h),所述酸水溶液洗脱后,收集第二个弱酸性离子交换树脂柱体积及以后的流出液。

进一步,所述弱酸性离子交换树脂为下列之一:XR157、XR140B、XR01TM、D113,优选XR140B。

本发明还提供一种不含氯离子Nisin盐在制备抑菌剂中的应用,所述抑菌剂为黄色微球菌或李斯特氏菌抑菌剂。

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