[发明专利]一种从禽蛋、禽肉及猪肉中高效同时提取甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺多残留的方法

说明书

本发明涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种从禽蛋、禽肉及猪肉中高效同时提取甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺多残留的方法，包括如下步骤：1）禽蛋、禽肉或猪肉样品提取与净化：针对禽蛋样品，以体积比为98:2乙腈:氨水为提取剂，针对禽肉或猪肉样品，以体积比为98:2的乙酸乙酯:氨水为提取剂；2）超高效液相色谱‑荧光检测。本发明以加速溶剂萃取法同时提取禽蛋、禽肉及猪肉中甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺残留，甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在禽蛋、禽肉及猪肉中添加浓度分别为LOQ、0.5 MRL、1.0 MRL、2.0 MRL的提取回收率均在80.00%以上，满足兽药残留检测方法的需求。

技术领域

本发明涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种用加速溶剂萃取仪从禽蛋、禽肉及猪肉中同时高效提取甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的方法。

背景技术

在对动物源性食品中的兽药进行检测时，只有将药物从样本中提取出来，才可能建立起高效的检测方法。甲砜霉素是氯霉素类衍生物，为白色或类白色的结晶性粉末或晶体，无臭，储存温度为20℃±4℃。在二甲基甲酰胺中的溶解性最强，溶于甲醇，微溶于水，几乎不溶于于乙醚或氯仿。熔点为162.6℃，0.5％水溶液的pH为5.9，最大吸收波长为224nm。氟苯尼考既是氯霉素的结构同系物也是甲砜霉素的结构类似物，为白色或类白色的结晶性粉末，无臭，味苦，储存温度为20℃±4℃，极易溶于二甲基甲酰胺，溶于甲醇，微溶于冰醋酸，极微溶于水或氯仿。熔点为154.9℃，0.5％水溶液的pH值为4.5-6.5，最大吸收波长为224nm。氟苯尼考胺为氟苯尼考在机体内的主要代谢产物。国内外关于动物源性食品中提取甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的方法主要为液-液萃取法和固相萃取法，一般提取剂为碱性乙酸乙酯和碱性乙酸乙酯-乙腈溶液。但目前为止，采用加速溶剂萃取技术同时提取禽蛋、禽肉及猪肉中甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺残留的方法在国内外均尚未见报道。

发明内容

为解决从禽蛋、禽肉及猪肉中快速、高效同时提取甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的问题。本发明采用加速溶剂萃取(ASE)技术同时提取禽蛋、禽肉及猪肉中甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的残留。加速溶剂萃取技术因具有溶剂用量少、萃取速度快、效率高、回收率高、重现性好和自动化程度高等优势而被广泛应用在兽药残留分析领域。甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺化学性质稳定适合加速溶剂萃取，同时相比液-液萃取法，可以避免手动萃取带来的误差和重现性差等问题，耗时短、适合批量处理样品。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：一种从禽蛋、禽肉及猪肉中同时提取甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺残留的方法，包括如下步骤：

1)禽蛋、禽肉或猪肉样品提取与净化：针对禽蛋样品，以体积比为98:2乙腈:氨水为提取剂，针对禽肉或猪肉样品，以体积比为98:2的乙酸乙酯:氨水为提取剂，提取温度为80±2℃；

2)超高效液相色谱-荧光检测；

a.超高效液相色谱；

b.荧光检测：采用荧光检测器，激发波长233±2nm，发射波长284±2nm。

步骤a中，超高效液相色谱条件：以ACQUITY BEH C₁₈为色谱柱；以流动相A：含0.005mol/L的NaH₂PO₄、0.003mol/L十二烷基硫酸钠和0.05％的三乙胺的水溶液和流动相B：乙腈为流动相；流动相A的pH为5.3±0.1。在步骤a中，分离禽蛋中目标物时流动相A:B＝64:36V/V，分离禽肉及猪肉中目标物时流动相A:B＝65:35V/V；所述的目标物指甲砜霉素、氟苯尼考或氟苯尼考胺。步骤a中，所述的百分比为体积百分比。进样体积：10μL；流速：0.2mL/min；柱温：30℃。