[发明专利]Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法在审
| 申请号： | 201910078622.9 | 申请日： | 2019-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN109609605A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 付彬;徐兴然;彭怡;王柏彬;杨丹;杨春丽;吴惠 | 申请（专利权）人： | 西南大学;山东省实验动物中心（山东省实验动物监测中心） |
| 主分类号： | C12Q1/6848 | 分类号： | C12Q1/6848 |
| 代理公司： | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 | 代理人： | 邓亚君 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 剪接 基因转录 检测 有效证明 套式PCR 生物技术领域 动物组织 检测分析 理论基础 细胞模型 致病机理 提取RNA 内源性 逆转录 转录体 人源 鼠源 细胞 治疗 研究 | ||
1.Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：
（1）提取RNA；
（2）将RNA逆转录得到cDNA；
（3）以cDNA为模板进行套式PCR，套式PCR包括先后进行的第一次PCR和第二次PCR，第一次PCR的上下游引物分别为F-F和F-R，第二次PCR的上下游引物分别为T-F和T-R；套式PCR完成后，对产物进行检测分析。
2.根据权利要求1所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，步骤（2）中，RNA进行逆转录前，除去其中的基因组DNA。
3.根据权利要求2所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，F-F碱基序列如SEQ ID NO.1所示；F-R碱基序列如SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求2所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，F-F碱基序列如SEQ ID NO.1所示；F-R碱基序列如SEQ ID NO.3所示。
5.根据权利要求3或4所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，第一次PCR的反应体系及程序如下表所示：
。
6.根据权利要求3或4所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，T-F碱基序列如SEQ ID NO.4所示；T-R碱基序列如SEQ ID NO.5所示。
7.根据权利要求6所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，第二次PCR的反应体系及程序如下表所示：
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8.根据权利要求6所述的Htt基因转录RNA Exon1内剪接现象的检测方法，其特征在于，第二次PCR的反应体系及程序如下表所示：
。
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