[发明专利]一种关节软骨冷冻保护液及软骨冷冻保存方法

权利要求书

1.一种关节软骨冷冻保护液，其特征在于：所述冷冻保护液，以重量份计，包括以下组分：羧甲基淀粉18-22份、鼠李糖2-3份、鲸蜡烯1-2份、微晶纤维素2-4份、半乳甘露糖4-6份、胞壁酰二肽4-6份、三棕榈酰五肽3-5份、α-熊果苷0.5-1.5份、去离子水70份。

2.根据权利要求1所述的一种关节软骨冷冻保护液，其特征在于：所述冷冻保护液，以重量份计，包括以下组分：羧甲基淀粉20份、鼠李糖3份、鲸蜡烯2份、微晶纤维素3份、半乳甘露糖5份、胞壁酰二肽5份、三棕榈酰五肽4份、α-熊果苷1份、去离子水70份。

3.根据权利要求1所述的一种关节软骨冷冻保护液的制备方法，其特征在于：

所述冷冻保护液的制备方法为：将各组分混合搅拌均匀后，先在3MPa下进行均质处理3分钟，然后采用超声处理，超声频率为18HZ，时间为10分钟，温度为40℃，超声处理后，调节pH至7，得到稳定的冷冻保护液。

4.一种采用关节软骨冷冻保护液进行软骨冷冻保存方法，其特征在于：所述冷冻保存方法，包括淋洗、滴加部分冷冻保护液、加入剩余冷冻保护液、程序降温。

5.根据权利要求4所述的一种采用关节软骨冷冻保护液进行软骨冷冻保存方法，其特征在于：所述淋洗，将新鲜的关节软骨移植物经磷酸盐缓冲液清洗1次后，采用冷冻保护液进行淋洗，冷冻保护液提前预冷至3-4℃；冷冻保护液的淋洗流量为2-3ml/min，淋洗时间为4-5分钟。

6.根据权利要求4所述的一种采用关节软骨冷冻保护液进行软骨冷冻保存方法，其特征在于：所述滴加部分冷冻保护液，向关节软骨移植物中，在氮气保护下，滴加部分冷冻保护液，滴加时间为5-7分钟；滴加的冷冻保护液的量占总量的50-55%；冷冻保护液的温度为3-4℃。

7.根据权利要求4所述的一种采用关节软骨冷冻保护液进行软骨冷冻保存方法，其特征在于：所述加入剩余冷冻保护液，加入剩余保护液，2-4℃条件下浸泡10分钟；关节软骨移植物与总的冷冻保护液的体积比为1:2-3。

8.根据权利要求4所述的一种采用关节软骨冷冻保护液进行软骨冷冻保存方法，其特征在于：所述程序降温，先以5-7℃/min的速率降至-20℃，然后以2-5℃/min的速率降低至-60℃，然后以8℃/min的速率降低至-100℃，然后转入液氮中保存。