[发明专利]一种基于上转换发光标记的基因载体、制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201910080499.4 | 申请日： | 2019-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN109880853A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 蒋雪峰;夏奡;王亚穷;沈健;黄晓华;张晓凤;胡瑾 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87;C09K11/85;C09K11/02 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 陈风平 |
| 地址： | 210024 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基因载体 上转换发光 制备 聚赖氨酸 多元酸 包覆 层层自组装法 标记基因 传递载体 基因转染 纳米粒子 配体交换 转染效率 静电 转基因 构建 水中 应用 | ||
1.一种基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将多元羧酸盐溶解在溶液中，得到多元羧酸盐溶液，向多元羧酸盐溶液中逐滴加入分散在环己烷中的上转换发光纳米粒子，搅拌反应，对上转换发光纳米粒子进行表面羧基化修饰，得到表面多羧酸修饰的上转换发光纳米粒子；
(2)向步骤(1)得到的表面多羧酸修饰的上转换发光纳米粒子加入到聚赖氨酸水溶液，搅拌反应，得到表面修饰有聚赖氨酸的上转换发光纳米粒子；
(3)重复步骤(1)，向多元羧酸盐溶液中逐滴加入将步骤(2)得到的上转换发光纳米粒子溶液，搅拌反应，再次进行表面羧基化修饰；
(4)向步骤(3)得到的表面多羧酸修饰的上转换发光纳米粒子加入到聚赖氨酸水溶液，搅拌反应，得到上转换发光标记的基因载体。
2.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述将多元羧酸盐溶解在选自水、乙醇和乙二醇中的一种或两种极性溶剂中。
3.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述多元羧酸盐为含有多个羧基的化合物，选自柠檬酸盐和酒石酸盐中的一种或两种。
4.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述多元羧酸盐溶液的质量浓度为0.01-10mg/mL。
5.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(1a)中所述搅拌反应的反应温度为0-100℃。
6.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述聚赖氨酸的分子量15～30万。
7.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述聚赖氨酸溶液的质量浓度为0.01-10mg/mL。
8.根据权利要求1所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述搅拌反应的反应温度为0-100℃。
9.一种由权利要求1-8任一所述的基于上转换发光标记的基因载体的制备方法制备的基因载体。
10.一种如权利要求9所述的基于上转换发光标记的基因载体用于负载DNA。
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