[发明专利]一种细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物

说明书

本发明涉及细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物，可有效解决免疫逃逸、长循环，通过增强声疗联合NO化疗，促进肿瘤细胞凋亡的问题，其解决的技术方案是，中空介孔二氧化钛纳米粒表面通过酰胺化反应共价修饰血红蛋白，然后物理负载NO供体型化疗药物RRx‑001，最后与细胞经低渗裂解液和裂解处理、匀浆得到的细胞膜囊泡共挤压，即得细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物，本发明制备方法稳定可靠，生产费用低，制得的细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物在制备抗肿瘤药物方面可发挥增强声疗联合NO化疗的作用，增强抗肿瘤效果，同时具有免疫逃逸、长循环等多功能，生物相容性好，是肿瘤治疗药物上的创新。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别是一种细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物。

背景技术

声动力学治疗(SonodynamicTherapy，SDT)是声敏剂被超声波激发而产生活性氧(ROS)，从而发挥抗肿瘤效应的手段。中空介孔二氧化钛纳米粒(TiO2)作为声敏剂具有生物相容性好、化学稳定性高、比表面积大等优点。但声疗是氧气依赖性的，而肿瘤部位乏氧，严重削弱了SDT的效果。血红蛋白(Hb)是红细胞中运输氧气的重要蛋白质，具有可逆的氧气结合与解离能力；同时脱氧Hb还具有亚硝酸盐还原酶活性，可以将亚硝酸盐还原为NO。化疗药RRx-001作为一种抗癌新药，也是一种NO供体，可增强脱氧Hb的亚硝酸盐还原酶活性，进一步增加肿瘤NO的产生，促进细胞凋亡。通过细胞膜包覆纳米粒，可完整保留细胞膜表面的复杂组成成分，不同的细胞膜修饰纳米粒后的功能不同，可提高纳米粒的生物相容性，实现免疫逃逸、长循环、主动靶向等，赋予纳米粒多功能的特征。因此，发明一种细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物应用在癌症治疗中具有重大意义和价值。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物，可有效解决免疫逃逸、长循环，通过增强声疗联合NO化疗，促进肿瘤细胞凋亡的问题。

本发明解决的技术方案是，中空介孔二氧化钛纳米粒表面通过酰胺化反应共价修饰血红蛋白，然后物理负载NO供体型化疗药物RRx-001，最后与细胞经低渗裂解液和裂解处理、匀浆得到的细胞膜囊泡共挤压，即得细胞膜仿生二氧化钛纳米粒的药物组合物，粒径为140-200nm。

具体包括以下步骤：

1)将0.6-1mL的正硅酸四乙酯(TEOS)加到装有0.3-0.5mL超纯水、15-25mL无水乙醇和0.6-1mL氨水的烧瓶中，强烈搅拌10-14h，10000-15000rpm离心10-20min，用无水乙醇洗至中性，得二氧化硅纳米粒(SiO₂)；

2)将步骤1)制得的二氧化硅纳米粒分散在10-20mL无水乙醇和0.05-0.15mL超纯水制成的溶液中，然后加入溶于2.5-7.5mL无水乙醇的0.05-0.15g羟丙基纤维素搅拌30min，成混合溶液，将0.5-1.5mL叔丁醇钛溶于2.5-7.5mL无水乙醇后，缓慢滴加到混合溶液中，80-90℃回流90-110min，10000-15000rpm离心10-20min，用无水乙醇洗2-4次，得SiO₂@TiO₂复合物；

3)将步骤2)中制得的SiO₂@TiO₂复合物分散于15-25mL超纯水中，加0.1-0.3gPVPk30，搅拌10-14h，10000-15000rpm离心5-10min得沉淀，沉淀再分散于15-25mL无水乙醇中，加入0.3-0.5mL超纯水、0.6-1mLTEOS和0.6-1mL氨水，磁力搅拌3-5h，10000-15000rpm离心5-10min，用无水乙醇洗至中性，得SiO₂@TiO₂@SiO₂复合物；