[发明专利]一种中药组合物的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种中药组合物的检测方法，其特征在于，所述中药组合物包括如下重量份的原料药组成：人参4-9 份、炒酸枣仁4-9份、炙淫羊藿4-9份、熟地黄5-12份、麸炒白术3-8份、制远志3-8份、石菖蒲4-9份、当归5-12份、炙甘草1-5份；所述中药组合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）称取当归和石菖蒲，加水浸泡，水蒸气蒸馏提取，得挥发油和水提取液，向挥发油中加入β-环糊精和水包合，得包合物；

（2）称取人参、熟地黄、制远志、麸炒白术、炒酸枣仁、炙淫羊藿、炙甘草，加水提取，得水提取液；

（3）合并步骤（1）和（2）制得的水提取液，减压浓缩得清膏；

（4）将步骤（3）制得的清膏干燥，制成干膏粉，加入所述包合物和常规辅料，混匀，即得；

所述中药组合物的检测方法包括如下人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量测定步骤：

A、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量测定

供试品溶液的制备：取所述中药组合物，依次经碱液提取、饱和正丁醇萃取、有机酸中和、蒸干和有机试剂溶解，得供试品溶液；

对照品溶液的制备：取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品，加入有机溶剂制成对照品溶液；

色谱条件：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以纯水为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，所述梯度洗脱程序具体为：0-35min，流动相A：流动相B的体积比为82％：18％；35-60min，流动相A：流动相B的体积比为82％：18％→76％：24％；60-61min，流动相A：流动相B的体积比为76％：24％→5％：95％；61-65min，流动相A：流动相B的体积比为5％：95％；65-66min，流动相A：流动相B的体积比为5％：95％→82％：18％；66-75min，流动相A：流动相B的体积比为82％：18％；检测波长：198-208nm；

测定法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定并计算；还包括如下述β-细辛醚的含量测定和当归的鉴别；

B、β-细辛醚的含量测定和当归的鉴别

供试品溶液的制备：取所述中药组合物，加入有机溶剂提取，得供试品溶液；

对照品溶液的制备：取β-细辛醚对照品、藁本内酯对照品，加入有机溶剂制成对照品溶液；

色谱条件：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05-0.2vt%磷酸或0.1-0.3vt%甲酸为流动相A，以甲醇为流动相B，梯度洗脱，检测波长：230-350nm；在所述β-细辛醚的含量测定和当归的鉴定中，所述梯度洗脱程序具体为：0-25min，流动相A：流动相B的体积比为45％：55％；25-26min，流动相A：流动相B的体积比为45％：55％→42％：58％；26-38min，流动相A：流动相B的体积比为42％：58％；38-38.5min，流动相A：流动相B的体积比为42％：58％→5％：95％；38.5-42min，流动相A：流动相B的体积比为5％：95％；42.5-47min，流动相A：流动相B的体积比为5％：95％→45％：55％；在所述β-细辛醚的含量测定和当归的鉴定中，0-25min时，检测波长为250-260nm；25-47min，检测波长为330-340nm。

2.根据权利要求1所述的中药组合物的检测方法，其特征在于，在所述人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量测定中，所述碱液为NaOH溶液、KOH溶液、Ca(OH)2溶液、氨水、碳酸钠溶液和碳酸钾溶液中的一种或几种的混合溶液；所述碱液的质量浓度为3-20%；所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇、氯仿和石油醚中的一种；所述有机酸为甲酸、乙酸和丙酸中的一种，所述有机酸的体积浓度为0.3%-0.5%。

3.根据权利要求1或2所述的中药组合物的检测方法，其特征在于，在所述人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量测定中，所述供试品溶液制备的具体步骤为：取所述中药组合物0.5-2g，研细，称定重量，加入正丁醇饱和的3-8wt%NaOH水溶液8-12ml，60-90℃下水浴加热5-10min，加入40-60ml饱和正丁醇，振荡，超声，冷却，离心，取上清液加入0.3-0.5vt%乙酸水溶液1-3ml， 70-90℃下水浴蒸干，冷却，残渣加入5-20vt%甲醇溶液溶解，稀释定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得。