[发明专利]鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒及其使用方法和应用

权利要求书

1.一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括PCR缓冲液体系、测序引物体系、Taq酶、UNG酶以及阴性质控品；

所述PCR缓冲液体系由PCR缓冲液1、PCR缓冲液2、PCR缓冲液3、PCR缓冲液4、PCR缓冲液5、PCR缓冲液6和PCR缓冲液7组成，且PCR缓冲液1包括引物对BRAF-1、引物对KRAS-1、引物对NRAS-1、引物对HRAS-1、引物对HRAS-2和引物对TERT-1，PCR缓冲液2包括引物对BRAF-2，PCR缓冲液3包括引物对KRAS-2，PCR缓冲液4包括引物对NRAS-2，PCR缓冲液5包括引物对HRAS-3，PCR缓冲液6包括引物对HRAS-4，PCR缓冲液7包括引物对TERT-2；

所述测序引物体系包括测定BRAF基因、KRAS基因、NRAS基因、HRAS基因及TERT基因上19个突变位点的引物对BRAF-2、引物对KRAS-2、引物对NRAS-2、引物对HRAS-3、引物对HRAS-4和引物对TERT-2；

所述19种突变位点依次为：BRAF基因的T1799A和A1801G，KRAS基因的G34A、G34T、G35A、G35T、G37C、G37T和G38A，NRAS基因的C181A、A182G、A182T、A183T和A183C，HRAS基因的G35T、C181A和A182G，TERT基因的C250T和C228T。

2.根据权利要求1所述的一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，BRAF-1如SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.27所示，BRAF-2如SEQ ID NO.28和SEQ ID NO.29所示，KRAS-1如SEQ ID NO.30和SEQ ID NO.31所示，KRAS-2如SEQ ID NO.32和SEQ ID NO.33所示，NRAS-1如SEQ ID NO.34和SEQ ID NO.35所示，NRAS-2如SEQ ID NO.36和SEQ ID NO.37所示，HRAS-1如SEQ ID NO.38和SEQ ID NO.38所示，HRAS-2如SEQ ID NO.40和SEQ ID NO.41所示，HRAS-3如SEQ ID NO.42和SEQ ID NO.43所示，HRAS-4如SEQ ID NO.44和SEQ IDNO.45所示，TERT-1如SEQ ID NO.46和SEQ ID NO.47所示，TERT-2如SEQ ID NO.48和SEQ IDNO.49所示。

3.根据权利要求1所述的一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，所述PCR缓冲液1、PCR缓冲液2、PCR缓冲液3、PCR缓冲液4、PCR缓冲液5、PCR缓冲液6和PCR缓冲液7均还包括有PCR buffer、dNTP或dUTP、无核酸酶水。

4.根据权利要求3所述的一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，所述PCR buffer的浓度为10×。

5.根据权利要求3所述的一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，所述dNTP的浓度为10mM-20mM。

6.根据权利要求3所述的一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，所述PCR缓冲液1、PCR缓冲液2、PCR缓冲液3、PCR缓冲液4、PCR缓冲液5、PCR缓冲液6和PCR缓冲液7均还包括有Q-Solution。

7.根据权利要求1所述的一种鉴别人甲状腺结节良恶性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的保存温度为-20℃。