[发明专利]小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型及构建和应用在审
| 申请号： | 201910094534.8 | 申请日： | 2019-01-27 |
| 公开（公告）号： | CN110241082A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 潘昱辰;王存金 | 申请（专利权）人： | 潘昱辰 |
| 主分类号： | C12N5/0786 | 分类号： | C12N5/0786;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人： | 郭海燕 |
| 地址： | 225003*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人补体 小鼠巨噬细胞 复合物体 培养液 巨噬细胞 细胞悬液 构建 攻击 硫乙醇酸盐培养基 红细胞 质量百分数 步骤构建 免疫系统 杀伤细胞 体外模型 细胞功能 小鼠腹腔 灭菌 腹水 滴入 孵育 孔板 破片 制备 应用 调控 | ||
1.一种小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型，其特征是通过以下步骤构建形成：
(1)将1mL灭菌后的质量百分数为3％的硫乙醇酸盐培养基注入小鼠腹腔，两天后抽腹水，离心后去上清及红细胞，加DF12培养液重新制备成细胞悬液，再将细胞悬液滴入孔板或破片上，即为原代巨噬细胞；
(2)根据不同的需求向原代巨噬细胞的培养液中添加C5b-6、C7、C8和C9，孵育后形成小鼠巨噬细胞人补体体外模型，同时根据实验需要添加不同量的人补体成分C5b-6、C7、C8和C9可以控制形成的MAC的量的多少，达到溶破杀伤细胞或者是调控细胞功能的效果。
2.根据权利要求1所述的小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型，其特征是在步骤(1)的原代巨噬细胞培养液中根据医学需要添加一定量的特异性膜抗体，以引发原代巨噬细胞的抗原抗体反应。
3.权利要求1所述的小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型的构建方法，其特征是包括以下步骤：
(1)将1mL灭菌后的质量百分数为3％的硫乙醇酸盐培养基注入小鼠腹腔，两天后抽腹水，离心后去上清及红细胞，加DF12培养液重新制备成细胞悬液，再将细胞悬液滴入孔板或破片上，即为原代巨噬细胞；
(2)根据不同的需求向原代巨噬细胞的培养液中添加C5b-6、C7、C8和C9，孵育后形成小鼠巨噬细胞人补体体外模型，同时根据实验需要添加不同量的人补体成分C5b-6、C7、C8和C9可以控制形成的MAC的量的多少，达到溶破杀伤细胞或者是调控细胞功能的效果。
4.根据权利要求3所述的小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型的构建方法，其特征是在步骤(1)的原代巨噬细胞培养液中根据医学需要添加一定量的特异性膜抗体，以引发原代巨噬细胞的抗原抗体反应。
5.权利要求1所述小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型的应用，其特征是用于检测各种胞分泌因子含量和医学影像学检测。
6.根据权利要求5所述小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型的应用，其特征是在用于医学影像学检测事先用质量百分数为4％的PFA固定。
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