[发明专利]一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法

权利要求书

1.一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）乙醛酸上的羧基与生物素进行连接，制得生物素修饰的乙醛酸，作为氨基残留物检测的通用中间体；

（2）制备氨基残留物抗体修饰的磁性粒子和质控抗体修饰的磁性粒子；

（3）生物素修饰的乙醛酸与氨基残留物反应，并与步骤（2）制得的氨基残留物抗体修饰的磁性粒子在室温下孵育，通过磁分离去除上清并使用磷酸盐缓冲液分离洗涤，最后一次洗涤完成后将磁性粒子再次用磷酸盐缓冲液重悬，再次重悬后的溶液即为待检测物；将质控抗体修饰的磁性粒子再与上述待检测物进行混合，制得混合待检测物；

（4）以底板、样品垫、层析膜、吸水垫和外壳构建成免疫层析试纸条，层析膜上设有检测线和质控线，检测线上固定有链霉亲和素，质控线上固定有识别质控抗体的二抗，所述层析膜、底板和外壳均没有荧光特性；

（5）将混合待检测物滴加于试纸条的样品垫处，进行免疫层析，当混合检测液流经检测线和质控线后，检测线和质控线的位置将会出现指示信号，根据检测线的信号强度，实现目标物的定量检测。

2.根据权利要求1所述的一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，所述生物素为氨基聚乙二醇生物素，生物素通过氨基与乙醛酸的羧基相连接。

3.根据权利要求1所述的一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，所述氨基残留物包括金刚烷胺、磺胺类、克仑特罗、或抗生类，所述磺胺类包括磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑或磺胺喹恶啉，所述抗生类包括庆大霉素、卡那霉素、安普霉素、链霉素或新霉素。

4.根据权利要求1所述的一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，所述磁性粒子为羧基、氨基或者羟基修饰的磁纳米粒子或金包磁纳米粒子。

5.根据权利要求1所述的一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，所述质控抗体为与残留物抗体不产生交叉反应的抗体。

6. 根据权利要求1所述的一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，所述磁性粒子的粒径为100-300 nm。