[发明专利]一种DC-CTL细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法

说明书

本发明公开了一种DC‑CTL细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法，该试剂盒包括盒盖和盒体，所述盒体内部设有一个海绵托，该海绵拖上设有六个固定孔，该六个固定孔内分别放置有内置调制CTL细胞因子激活液IL2的试剂瓶，内置调制CTL细胞因子激活液IFN‑γ的试剂瓶，内置调制DC细胞因子激活液IL‑4和GM‑CSF混合液的试剂瓶，内置调制DC细胞因子激活液TNF‑α的试剂瓶，内置淋巴细胞分离液的试剂瓶，内置无血清培养液的试剂瓶。因此，本发明DC‑CTL细胞的诱导活化试剂盒组成简单，实用方便，试剂瓶为分体式结构，便于清洗消毒，降低了培养过程中染菌的风险，可在短时间内培养出质量均一的DC‑CTL细胞。

技术领域

本发明涉及试剂盒或试剂箱技术领域，具体涉及一种DC-CTL细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法。

背景技术

肿瘤生物治疗是当今肿瘤研究领域的一大热点，其中肿瘤过继性免疫治疗在肿瘤生物治疗中占据着重要地位。对于促进患者免疫系统的重建、消除微小残留病变以及骨髓净化都具有良好效果。肿瘤过继性免疫治疗中的一个关键问题是寻找合适的肿瘤杀伤细胞。长时间的探索，人们认识到肿瘤免疫的基础是肿瘤特异性抗原的存在，以及免疫系统对肿瘤细胞的有效应答，并认识到细胞免疫在肿瘤免疫治疗中起到关键作用，特别是具有抗原呈递能力的树突状细胞(DC,dendritic cell)以及具有杀伤功能的CTL细胞，从而为肿瘤免疫治疗成为可能。

近年来对DC-CTL的研究和研发深入，已经形成了较为成熟的DC-CTL的诱导和培养方法，但在细胞培养过程中采用的试剂较多标准不一致，培养过程中的工作量大，培养时间长，染菌风险大，使许多研究人员难以在短时间内培养出质量均一的DC-CTL细胞。

因此，有必要设计一种新的DC-CTL细胞诱导活化的试剂盒及其应用方法，以克服上述缺陷。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种DC-CTL细胞的诱导活化试剂盒及其应用方法，在短时间内能够培养出质量均一的DC-CTL细胞。

本发明的目之一在于提供一种DC-CTL细胞的诱导活化试剂盒，包括带盒盖和盒体，所述盒体内部设有一个海绵托，该海绵拖上设有六个固定孔，该六个固定孔内分别放置有内容调制CTL细胞因子激活液IL-2的试剂瓶，内容调制CTL细胞因子激活液IFN-γ的试剂瓶，内容调制DC细胞因子激活液IL-4和GM-CSF混合液的试剂瓶，内容调制DC细胞因子激活液TNF-α的试剂瓶，内容淋巴细胞分离液的试剂瓶，以及内容无血清培养液的试剂瓶。

较佳的，IL-2的浓度为300-1200IU/ml，IFN-γ浓度为400-1600U/ml，IL-4和GM-CSF混合液中IL-4的浓度为50-300ng/ml以及GM-CSF浓度为600-1500U/ml，TNF-α的浓度为300-1200U/ml。

较佳的，IL-4和GM-CSF混合液中IL-4的浓度为100ng/ml以及GM-CSF浓度为1000U/ml U/ml。

较佳的，TNF-α的浓度为500U/ml。

较佳的，IFN-γ浓度为1000U/ml。

较佳的，IL-2的浓度为500IU/ml。

为达上述目的，本发明还提供一种DC-CTL细胞的诱导活化试剂盒的应用方法，用于DC-CTL细胞的诱导活化试剂盒，该试剂盒包括调制CTL细胞因子激活液IL-2，调制CTL细胞因子激活液IFN-γ，调制DC细胞因子激活液IL-4和GM-CSF混合液，调制DC细胞因子激活液TNF-α，淋巴细胞分离液，以及无血清培养液，包括如下步骤：

单采机采集外周血单个核细胞1×10⁹-3×10⁹；