[发明专利]人源化抗Aβ单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及抗体药物技术领域，尤其涉及人源化抗Aβ单克隆抗体及其应用。本发明提供的人源化抗Aβ单克隆抗体能够抑制Aβ单体聚合，保护神经细胞免受Aβ的毒性，有一定的改善阿尔茨海默痴呆模型小鼠认知学习记忆能力的作用，可用于治疗和诊断淀粉样变性相关的疾病和病症，如阿尔茨海默病。

技术领域

本发明涉及抗体药物技术领域，尤其涉及人源化抗Aβ单克隆抗体及其应用。

背景技术

Aβ

β淀粉样蛋白(Aβ)由人的第21号染色体基因编码，包含39-43个氨基酸，呈β-片层结构，疏水，分子量为4KDa。Aβ来源于蛋白淀粉样蛋白前体(Amyloid precursor protein，APP)经蛋白水解酶作用后断裂产生的残基多肽。APP可以被α-，β-，γ-蛋白酶分解，分解后的产物具有不同的生物学功能。其中β-蛋白酶和γ-蛋白酶的连续作用产生Aβ。γ-蛋白酶产生Aβ的C端，切断在APP跨膜区然后可以产生大量39-43个氨基酸的残基亚型。所有残基亚型中最常见的是Aβ40和Aβ42。前者是典型的APP在内质网被切断所形成的，而后者是在跨高尔基网络内形成的。

Aβ的病理学机制

目前已知中枢神经系统(CNS)中所有神经细胞包括神经元、星形细胞、小胶质细胞和内皮细胞均可表达APP并产生Aβ。在正常生理条件下，APP由α-分泌酶水解产生可溶性的sAPPα片段。该片段包含APP的胞外区以及位于胞膜上的83个氨基酸的C末端。 sAPPα能够调节神经元的兴奋性，提高突触的可塑性，学习和记忆能力，并增强神经元对氧化和代谢应激的抵抗力。在神经病理的条件下，APP首先被β-分泌酶1(BACE)水解，产生sAPPβ片段和一段细胞膜连接的99个氨基酸的肽段(C99)。随后，C99肽段经由γ- 分泌酶作用，产生Aβ。不同于sAPPα，Aβ可以引起神经突触功能的丧失，降低神经元的可塑性，改变细胞能量代谢，诱导氧化应激反应以及线粒体的功能紊乱，从而造成细胞内钙离子的失衡。Aβ，尤其是Aβ42的形成，聚集和沉积可以引发神经毒性和神经退行性疾病，也是阿尔茨海默病(AD)发病机制中的重要一环。

Aβ与阿尔茨海默病(AD)

Aβ作为阿尔茨默海病脑内主要病理标志性蛋白之一，它的形成、沉积和降解贯穿了 AD的整个病理过程。Aβ分为可溶性的和不可溶性的两种，可溶性的Aβ本身并无神经毒性，当β-折叠形成丝状纤维聚集物变为不溶性沉淀后则具有神经细胞毒性作用，人Aβ的一级结构是神经细胞毒性作用的决定因素。根据文献报道，Aβ的神经毒性主要体现在以下4个方面：胆碱性神经元损伤、神经细胞凋亡、过氧化损伤和炎性反应。

胆碱性神经元损伤

向海马区与皮质投射的基底前区胆碱能系统神经元及神经突触的大量损伤、丧失是 AD患者记忆、认知能力减退的主要原因。Aβ激活蛋白激酶GSK-3/糖原合成酶激酶-3β，引起tau蛋白及线粒体丙酮酸脱氢酶磷酸化，使酶活性降低，致丙酮酸转化为乙酰辅酶A(actyl coenzyme A)减少，从而使乙酰胆碱(ACh)合成减少，琥珀酸脱氢酶抑制，供能减少，造成胆碱能神经元及突触损伤、退变、递质传递障碍，胆碱能系统活性下降。而ACh 的减少又导致Aβ的产生增多，进而形成恶性循环。

神经细胞凋亡