[发明专利]一种复合益生菌肠道靶向控释体系及其制备方法

权利要求书

1.一种复合益生菌肠道靶向控释体系制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)益生菌菌种活化：

在无菌的条件下，将多种益生菌的冻干粉菌粉接种到已经灭菌冷却的MRS液体培养基中活化、厌氧培养，分离、弃上清、收集菌体，再用无菌生理盐水洗涤，再次离心弃上清液，收集混合菌悬液；

(2)蓝靛果多糖的制备：

取新鲜的蓝靛果，粉碎后将蓝靛果粉末溶于蒸馏水中，超声浴提，然后加入无水乙醇静置，去除上清液，滤渣用蒸馏水溶解，除蛋白，将沉淀物冷冻干燥即得蓝靛果多糖提取物；

(3)构建多元复合物控释体系：

将干燥的卵清白蛋白溶于蒸馏水中，然后加入果胶溶液，卵清白蛋白与果胶的配比为1：0.5～1，两者混合后将pH调到7，在磁力搅拌的同时将卵清白蛋白与果胶二元复合物：蓝靛果多糖溶液按照体积比2:1逐滴加入蓝靛果多糖溶液，于4℃下过夜以保证充分水合；

(4)益生菌包埋：

将步骤(1)收集到的混合菌悬液用注射器逐滴加入到步骤(3)制备得到的复合物中，在磁力搅拌器下连续搅拌以促使充分混合，然后调pH值为4.6，以得到负载益生菌的控释体系。

2.根据权利要求1所述的一种复合益生菌肠道靶向控释体系制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，多种益生菌为质量比1：1：1：1：1的长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、酵母菌、乳酸菌。

3.根据权利要求1所述的一种复合益生菌肠道靶向控释体系制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，蓝靛果多糖的制备具体过程如下：

取新鲜的蓝靛果，粉碎后将蓝靛果粉末溶于蒸馏水中，料液比为1：15，置于40℃的超声水浴中浸提60min，并设置超声功率为175w，浸提后加入3～5倍体积的无水乙醇静置10h，然后4000rpm离心20min后去除上清液，滤渣用蒸馏水溶解，用Sevag[V(三氯甲烷)：V(正丁醇)＝4：1]试剂除蛋白，将沉淀物冷冻干燥即得蓝靛果多糖提取物。

4.根据权利要求1所述的一种复合益生菌肠道靶向控释体系制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，将干燥的卵清白蛋白溶于蒸馏水中，在磁力搅拌的同时将卵清白蛋白和蓝靛果多糖溶液按照体积比2:1逐滴加入蓝靛果多糖溶液，于4℃下过夜以保证充分水合。

5.根据权利要求1所述的一种复合益生菌肠道靶向控释体系制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中菌体液与复合物的体积比为1：1。

6.如权利要求1～5任一项所述的一种复合益生菌肠道靶向控释体系制备方法制得的控释体系。

7.一种使用如权利要求6所述的控释体系制备湿胶囊的方法，其特征在于，具体过程如下：将得到的体系溶液不断搅拌，冷却到室温，然后在冰浴环境下降低温度为5℃，加入固化剂CaCl₂溶液后持续搅拌待沉淀析出，离心后过滤收集，用灭菌的生理盐水洗涤微球，得到湿胶囊。