[发明专利]一种磁性纳米粒子及其制备高眼压动物模型的方法

权利要求书

1.一种基于磁性纳米粒子制备高眼压动物模型的方法，所述的磁性纳米粒子粒径范围为100～1200nm，由小尺寸磁性纳米粒子组装交联而成；所述的小尺寸磁性纳米粒子粒径范围为10～100nm，具有核壳结构，核为四氧化三铁磁性纳米粒子，壳为介孔二氧化硅纳米层，介孔二氧化硅纳米层包覆在四氧化三铁磁性纳米粒子表面；所述的四氧化三铁磁性纳米粒子和介孔二氧化硅纳米层之间还具有含荧光探针的介孔二氧化硅中间层，以便于后续可通过核磁共振或荧光显微镜观察并跟踪磁性纳米粒子的在体运行和组织分布；所述的介孔二氧化硅纳米层表面还具有聚合物分子修饰层，聚合物分子之间通过交联反应，将小尺寸磁性纳米粒子组装成磁性纳米粒子；所述的聚合物分子，其一端包含硅氧烷基团，另一端包含巯基基团；聚合物分子通过硅氧烷基团接枝到介孔二氧化硅纳米层表面，再通过另一端的巯基基团实现分子间交联，进而通过聚合物分子间交联实现小尺寸磁性纳米粒子的组装交联；其特征在于，该方法包括如下步骤：

S1：小尺寸磁性纳米粒子的制备

S11：从Fe₃O₄到Fe₃O₄@SiO₂-FITC

将磁铁粉-正己烷分散液稀释在正辛醇和聚乙二醇辛基苯基醚的环己烷溶液中，加入氨水形成稳定的反相微乳液，在连续机械搅拌下加入硅酸乙酯TEOS进行反应，以形成二氧化硅涂覆的磁性纳米粒子分散液，即Fe₃O₄@SiO₂样品；在上述Fe₃O₄@SiO₂分散液溶液中加入异硫氰酸荧光素FITC荧光探针母液，并在避光条件下搅拌，产物经磁力分离纯化、乙醇洗涤后真空干燥，获得Fe₃O₄@SiO₂-FITC磁性纳米粒子；

S12：从Fe₃O₄@SiO₂-FITC到Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂

Fe₃O₄@SiO₂-FITC磁性纳米粒子分散于十六烷基三甲基溴化铵CTAB、去离子水和正己烷的混合溶液中，超声处理分散均匀；在连续搅拌下，将氨水溶液和TEOS滴加到上述混合溶液中，在避光条件下搅拌，通过磁力分离收集产物，用乙醇反复洗涤；获得的样品将其在乙醇溶液中回流，以除去CTAB模板试剂，进一步用乙醇洗涤，磁力分离，得到Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂磁性纳米粒子；

S13：从Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂到Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂-P-SH

将巯基-聚合物P-丙基三甲氧基硅烷加入到Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂磁性纳米粒子的乙醇分散液中进行反应，使用磁力分离法将经-P-SH修饰的纳米粒子分离，并用乙醇反复洗涤纯化，得到Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂-P-SH；

S2：小尺寸磁性纳米粒子组装交联成磁性纳米粒子

S21：Fe₃O₄@SiO₂-FITC@mSiO₂-P-SH磁性纳米粒子表面大量存在的-SH基团，通过氧化形成-S-S-，以实现聚合物间化学交联，以及纳米粒子间化学交联，形成磁性纳米粒子；

S22：将步骤S21的交联反应置于乳液聚合的受限环境下进行，交联得到的磁性纳米粒子即可具有均匀的尺寸，形成稳定的磁性纳米粒子分散液；

S3：磁性纳米粒子制备高眼压动物模型

将所述磁性纳米粒子以水分散液形式注射进眼前房，以环形磁铁引导磁性纳米粒子聚集于房角，随着房水循环逐渐分散于小梁网、施累姆氏管及静脉毛细血管，在房水运行通道各级组织中富集，阻碍房水回流到体循环，从而造成高眼压。