[发明专利]一种测定豆芽中6-苄基腺嘌呤的方法

说明书

本发明公开了一种测定豆芽中6‑苄基腺嘌呤的方法，包括如下步骤：(1)制备基质提取液；(2)制备供试品溶液；(3)制备标准工作溶液；(4)分别将标准工作溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱‑质谱联用仪进行分析。本发明检测6‑苄基腺嘌呤稳定性高，检测限低，萃取效率高，富集倍数大，有机溶剂消耗量小，易于操作，适用于豆芽中6‑苄基腺嘌呤的快速定性和定量分析，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，涉及一种测定豆芽中6-苄基腺嘌呤的方法。

背景技术

豆芽，又名如意菜，近年来深受广大消费者喜爱，部分不法商家为缩短生产周期、增加产量、改善豆芽外观以便于销售，在豆芽培育过程中非法使用“AB粉”、“无根豆芽素”等，6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine，6-BA)则是其中主要成分，属植物生长调节剂类激素残留，弱毒蓄积性，达到一定剂量会显示某些胚胎毒作用。6-苄基腺嘌呤在食品中使用与残留受到越来越广泛的关注，许多国家和国际组织均制定了6-苄基腺嘌呤残留的限量标准。美国允许6-苄基腺嘌呤作为植物生长调节剂用于农业生产，无残留限定，但使用范围都不包括豆芽；欧盟允许包括绿豆芽在内的多种农产品使用6-苄基腺嘌呤使用，残留限量为0.01mg/kg；日本则将6-苄基腺嘌呤列入《肯定列表》目录，并分别制定了残留限量。2015年4月13日，我国国家食品药品监督管理总局、农业部、国家卫生和计划生育委员会发布《关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄基腺嘌呤等物质的公告(2015年第11号)》，禁止豆芽中添加或使用6-苄基腺嘌呤。因此，豆芽中6-苄基腺嘌呤残留检测应引起足够的重视。

在豆芽样品检测中，因实际样品基质组分较为复杂，干扰物质多且目标物含量较低，通常需要采用适当的前处理技术才能进行分析测定。当前关于豆芽中6-苄基腺嘌呤的检测方法中，前处理技术主要有固相萃取、分散固相微萃取、液液萃取等，然而这些传统的技术存在不少缺点：实验操作冗繁、耗时，萃取效率低，过程中消耗大量有机试剂，易对环境产生污染；同时，目前国内外用于豆芽中6-苄基腺嘌呤的检测方法主要有离子色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法、高效液相色谱-飞行时间质谱法和高效液相色谱-串联质谱法等，有引入干扰而出现假阳性结果。

目前未见将超声辅助-分散液液微萃取前处理技术联用超高效液相色谱-串联质谱仪应用于豆芽中使用6-苄基腺嘌呤检测的研究。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种测定豆芽中6-苄基腺嘌呤的方法。

本发明测定豆芽中6-苄基腺嘌呤的方法，它是采用超声辅助-分散液液微萃取-超高效液相色谱-串联质谱的测定方法，包括如下步骤：

(1)制备基质提取液：取待测豆芽样品粉碎，加甲醇提取，再加无水硫酸钠和氯化钠提取，离心，取上清液过滤，得基质提取液；

(2)制备供试品溶液：取基质提取液，依次加入水和氯化钠溶解，再注入萃取剂混匀，萃取，离心，取底层沉积相作为供试品溶液；

(3)制备标准工作溶液：称取6-苄基腺嘌呤标准品，加甲醇溶解，稀释，用步骤(1)基质提取液定容，作为标准工作溶液；

(4)分别将标准工作溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱-质谱联用仪进行分析：

色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱；

流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1％甲酸水溶液；

梯度洗脱条件：

0～1min：10％甲醇，1～10min：90％甲醇，0～11min：10％甲醇，11～13min：10％甲醇；

质谱条件：

离子化模式，电喷雾离子源；