[发明专利]一种制备肺炎大鼠模型的方法及模型评价方法在审
申请号: | 201910118442.9 | 申请日: | 2019-02-16 |
公开(公告)号: | CN109833333A | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 丁军颖;刘清泉 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学附属北京中医医院 |
主分类号: | A61K35/74 | 分类号: | A61K35/74;G01N21/31 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人: | 舒欣 |
地址: | 100010 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大鼠模型 肺炎 模型评价 大鼠 制备 生物技术领域 铜绿假单胞菌 肺泡灌洗液 白细胞 大鼠死亡 模型建立 炎症因子 肺指数 无创 粘附 成功率 器官 升高 损伤 安全 | ||
1.一种制备肺炎大鼠模型的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)采用戊巴比妥钠麻醉大鼠;
(2)将大鼠鼻孔向上倾斜,利用微量加样器将含有铜绿假单胞菌的菌液滴入大鼠鼻腔;
(3)改变大鼠体位,使其保持直立30s~3min。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(2)中,将大鼠鼻孔向上倾斜45度。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述菌液的浊度值为0.8-1.2。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,滴入鼻腔的菌液体积为0.5-0.8mL。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述大鼠为6-8周龄SD雄性大鼠。
6.一种评价利用权利要求1所述的方法制备的肺炎大鼠模型的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)对所述肺炎大鼠进行开胸,结扎左主支气管;
(2)对右肺进行肺泡灌洗,吸取肺泡灌洗液,并检测肺泡灌洗液中的炎症因子IL-4、TNF-α和粘附因子IFN-γ的水平,
其中,当炎症因子IL-4和TNF-α的水平升高,和/或粘附因子IFN-γ水平降低,表明模型建立成功。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤(2)中肺泡灌洗液的制备方法为:以一次性输液器插入主支气管约3-4cm,固定,将3mL生理盐水注入气管内,轻翻肺组织,抽回再灌注,反复抽注5次,最后抽出肺泡灌洗液。
8.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于,进一步包括对肺泡灌洗液中的白细胞进行计数的步骤,其中,白细胞数目增加表明模型建立成功。
9.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于,在获取肺泡灌洗液后,进一步将大鼠的左右叶全肺组织均切下,称重记录,并根据下面公式计算肺指数:
肺指数=肺质量/体质量×100%
其中,肺指数增加,表明模型建立成功。
10.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于,进一步利用培养的方法获得肺泡灌洗液中铜绿假单胞菌的数目,其中,数目增加表明模型建立成功。
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