[发明专利]间充质干细胞外泌体微针贴剂及其制备和应用

说明书

本发明涉及一种间充质干细胞外泌体微针贴剂，贴剂中包括多个微针，形成所述微针的材料包括间充质干细胞外泌体、微针成型基质、微针固定基质、无机盐和水，其中，以重量为基准，微针成型基质、微针固定基质、无机盐和水的质量比为70～99:10～29:10～30:0.1～20:10～29；间充质干细胞外泌体为P2～P25代组织间充质干细胞经饥饿培养后，再用表皮细胞生长因子刺激后所得；微针成型基质和微针固定基质为具有生物相容性的可降解高分子。

技术领域

本发明涉及干细胞应用技术领域，尤其涉及一种间充质干细胞外泌体微针贴剂及其制备和应用。

背景技术

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成功能细胞，是一种未充分分化的细胞，具有再生各种组织器官的潜在功能。间充质干细胞(MSC)是干细胞家族的重要成员，来源于中胚层，属于多能干细胞。MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、调节免疫、支持造血和促进造血干细胞植入等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞。连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤的修复。除了骨髓外，人们还能够从脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及胎盘、羊水、脐带血中分离和制备间充质干细胞。近年来随着对间充质干细胞研究与应用越来越深入，间充质干细胞外泌体的功能逐渐成为新的研究热点。

外泌体是一种由真核细胞的多泡内涵体与细胞膜融合后释放到细胞外的级的膜性小囊泡，可由多种类型细胞分泌，内含不同种类的蛋白质、脂质、mRNA、microRNA、小分子等具有生物学活性的物质，与邻近细胞的细胞膜发生融合后将活性物质递送至受体细胞，实现细胞间的信息传递。现有研究证明间充质干细胞分泌的外泌体具有减少心肌损伤范围、保护急性肾小管损伤、促进神经再生、减少肺损伤、调节免疫和促进血管生成等作用。

在组织损伤修复方面，间充质干细胞移植后能够通过分泌富含活性物质的外泌体，刺激机体自身细胞的再生功能，促进皮肤黏膜及组织细胞分化、改善局部血供，减少创面组织细菌感染和炎症反应。因此，外泌体在促进组织损伤修复方面有独特疗效，有研究者利用间充质干细胞外泌体修复糖尿病足皮肤创面、褥疮等，收到了良好效果。例如，中国专利申请公开CN107158035A公开了人间充质干细胞外泌体外用凝胶治疗褥疮的应用,其采用不同饥饿培养时间，培养人间充质干细胞并提取外泌体治疗大鼠缺血性损伤，可以明显缩小伤口直径，缩短伤口愈合时间。

化疗药物所诱发的口腔黏膜炎或溃疡主要表现为口腔黏膜充血、红肿、糜烂；口腔溃疡伴随的口咽部疼痛影响病人进食及睡眠，不仅给病人增加痛苦，而且会导致营养不良、体力下降，影响患者的生活质量及肿瘤的后续化疗。其发病机理与病因较为复杂，虽有多种治疗手段，但效果不明显。基于间充质干细胞外泌体对组织细胞良好的修复功能和刺激机体自身细胞的再生功能，因此很适合应用于放化疗性口腔溃疡的治疗。如果开发一种间充质干细胞外泌体的体外应用制剂，可以以避免注射疼痛，方便病人使用。但外泌体包含的多肽和蛋白质为大分子，较难透过皮肤，吸收率低，是限制其临床应用的一个技术难点。

微针是最近十年发展起来的大分子物质经皮传递的理想手段，具有精确、高效、无痛、便利等优势。微针贴剂由级的微针基质和药物组成，以阵列形式排布，是特别适合皮肤黏膜使用的给药系统。其插入于皮肤黏膜内产生级的空洞，可在少量组织液中迅速溶解，从而释放药物。制备原理是应用微针基质包载生物大分子药物，在温和的制备条件和生物相容、无刺激的试剂和辅料制备成可供皮肤黏膜给药的药物传递系统。应用微针技术解决生物大分子黏膜给药吸收问题和口腔溃疡药物难于固定于伤面的问题。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种间充质干细胞外泌体微针贴剂及其制备和应用，其便于固定于创伤面，吸收好速度快，吸收率高，创口愈合速度快。