[发明专利]一种高结瘤固氮植物的培育方法在审
申请号: | 201910122103.8 | 申请日: | 2019-03-18 |
公开(公告)号: | CN109735561A | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 纪洪涛;李霞;王延旭;王倩 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/54 |
代理公司: | 石家庄轻拓知识产权代理事务所(普通合伙) 13128 | 代理人: | 张培元 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 结瘤 转基因植物 固氮植物 大豆 核苷酸序列 表达序列 表达载体 大豆植株 氮肥施用 固氮能力 正常植物 转化受体 根瘤 构建 培育 体内 | ||
1.一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:在植物体内分别过表达或者同时过表达序列表中的SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列,获得与正常植物相比具有高结瘤固氮能力的转基因植物。
2.根据权利要求1所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:首先构建含有SEQ ID NO:1所述基因和/或含有SEQ ID NO:2所述基因和/或含有SEQ ID NO:3所述基因和/或含有SEQ ID NO:4所述基因和/或含有SEQ ID NO:5所述基因的重组表达载体,然后利用此重组表达载体构建转化体,再利用此转化体侵染目的植物,筛选阳性植株,获得与正常植物相比根瘤数目增多的转基因大豆。
3.根据权利要求2所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:所述重组过表达载体以pTF101为骨架载体。
4.根据权利要求2所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:所述重组过表达载体上含连接有35S强启动子。
5.根据权利要求2所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:利用所述过表达载体转化农杆菌K599获得转化体,然后再利用农杆菌K599介导的毛状根转化法获得转基因植物,筛选阳性植株得到与正常植物相比具有高结瘤固氮能力的转基因植物。
6.根据权利要求1-5任一项所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:所述目的植物为蝶形花科植物。
7.根据权利要求1-5任一项所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:所述目的植物为大豆。
8.根据权利要求1所述的一种高结瘤固氮植物的培育方法,其特征在于:SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:5所示核苷酸的扩增引物对,其正向引物依次如序列表中SEQ ID NO:16~SEQID NO:20所示;其反向引物依次如序列表中SEQ ID NO:21~SEQ ID NO:25所示。
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