[发明专利]一种含有CHG成分的湿巾产品中微生物限度的检测方法

说明书

本发明公开了一种含有CHG成分的湿巾产品中微生物限度的检测方法，包括步骤S1，取湿巾样品，制备供试液；步骤S2，检测供试液中的需氧菌总数和霉菌酵母菌总数；步骤S3，取步骤S1中的供试液制备初增菌液A，检测初增菌液A中的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌以及铜绿假单胞菌；步骤S4，取步骤S1中的供试液制备初增菌液B，检测初增菌液B中的沙门氏菌。本发明提供的方法中，采用含有吐温‑80的无菌氯化钠‑蛋白胨缓冲液对滤膜进行冲洗，中和了湿巾配方中的杀菌剂成分CHG，并采用含有吐温‑80和卵磷脂的培养基进行培养，有效降低了检测中假阴性的可能性，提高了湿巾产品中微生物限度检测的准确度。

技术领域

本发明属于一次性卫生用品领域，具体涉及一种含有CHG成分湿巾产品中微生物限度的检测方法。

背景技术

微生物限度检测，检测能够自行繁殖的微生物的数量，是湿巾产品能否上市的重要指标，其原理是通过对湿巾产品的取样检测，通过相应的培养基培养，将湿巾中的微生物培养出来，如果湿巾中的微生物指标不符合标准要求，则判断产品不合格，不允许上市。

目前，一般都采用薄膜过滤法进行微生物限度的检测，并参照USP61和USP62测试。而市面上销售的人体清洁湿巾配方中一般会具有杀菌剂CHG(洗必泰)，据目前的测试方法会存在假阴性的结果。要想准确检测湿巾中的微生物，必须要对消除防腐剂对检测方法的干扰。而目前业内并没有针对含有杀菌剂CHG的湿巾产品中微生物限度的检测方法。因此，为了能够消除湿巾中防腐剂对微生物限度检测的影响，保证湿巾产品中微生物指标判断的准确性，亟需一种能够准确检测含有CHG成分的湿巾产品中微生物限度的方法。

发明内容

为了解决上述生产中的问题，本发明提供了一种含有CHG(洗必泰)成分的湿巾产品中微生物限度的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1，取湿巾样品加入到缓冲液中，制备供试液；

步骤S2，将供试液采用滤膜过滤，并采用缓冲液对滤膜进行冲洗，检测滤液中的需氧菌总数和霉菌酵母菌总数；

步骤S3，取步骤S1中的供试液制备初增菌液A，检测初增菌液A中的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌以及铜绿假单胞菌；

步骤S4，取步骤S1中的供试液制备初增菌液B，检测初增菌液B中的沙门氏菌；

其中，所述缓冲液为含有0.5％吐温-80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。

进一步地，所述步骤S1具体操作如下，剪取10g样品置于无菌三角瓶中，并加入90ml缓冲液，将无菌三角瓶置于摇床上摇匀，即得到质量体积比为1:10的供试液。

进一步地，所述步骤S2具体操作如下，取1ml 1:10供试液通过膜过滤器过滤，再取100ml无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行过滤冲洗，取一次过滤膜贴于大豆-酪蛋白消化物琼脂平板，将所述平板置于30-35℃培养箱中培养3-5天，用于检测需氧菌总数，取另一次过滤膜贴于沙氏葡萄糖琼脂平板，将所述平板置于20-25℃培养箱中培养5-7天，用于检测霉菌酵母菌总数。

进一步地，所述步骤S3中，初增菌液A的制备方法为，取10ml1:10的供试液至100ml大豆-酪蛋白消化物肉汤(TSB)中，在30-35℃条件下培养18-24小时，即得初增菌液A，所述大豆-酪蛋白消化物肉汤(TSB)中含有0.5％吐温80和0.07％卵磷脂。

进一步地，所述步骤S3中，初增菌液A中的金黄色葡萄球菌的检测方法为，用接种环从初增菌液A中挑取一环至甘露醇氯化钠琼脂(MSA)上涂匀，30-35℃倒置培养18-72小时；若MSA平板上有黄色菌落或外周有黄色环的白色菌落生长，应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验，确证是否为金黄色葡萄球菌；若平板上没有与上述形态特征相符或疑似的菌落生长，或虽有相符或疑似的菌落生长但革兰氏染色鉴定结果为阴性，判断供试品未检出金黄色葡萄球菌。