[发明专利]一种超高效合相色谱串接QDa同时快速检测酒类产品中8种酚酸类物质的方法

说明书

本发明公开了一种超高效合相色谱串接QDa同时快速检测酒类产品中8种酚酸类物质的方法，待测酒样经乙腈萃取后，采取HSS C18合相专用色谱柱为分离柱，以二氧化碳(A)+甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱，样品经超高效合相色谱(UPC²)分离后，采用QDa质谱检测器进行检测。本发明方法简单快捷、准确可靠，可用于同时检测酒类产品中8种酚酸类物质的含量。

技术领域

本发明涉及一种超高效合相色谱串接QDa同时快速检测酒类产品中8种酚酸类物质的方法，属于酒类分析技术领域。

背景技术

白酒风味是决定其品质的重要特征，有关白酒中挥发性香气物质的研究报道非常多，例如采用最先进的全二维气相飞行时间质谱仪可从浓香型白酒中鉴定出上千种物质。然而，白酒是固态发酵蒸馏的产物，这种固态蒸馏的方式使得白酒中存在一定的非挥发性物质。例如，非挥发性物质乳酸即是白酒中的重要组成成分，对白酒的风味形成和品质起着非常重要的作用。

据文献报道，非挥发性物质的存在对于白酒的风格特征产生了重要的作用：第一、潜在的重要呈味物质，构成了白酒口感的丰富性和复杂性；第二、与挥发性物质产生相互作用，调节挥发性物质的挥发性能，改变并协调白酒的香气结构，如对放香强度与香气持久性[产生调节作用；第三、独特和重要的生物活性功能和效果。

因此研究白酒中的非挥发性物质组成以及量比关系对于提高白酒的品质具有重要意义；本研究可为白酒的勾调设计提供理论数据支撑，同时有助于提升白酒勾调设计的精细化和科学化；对于一些非挥发性功能物质或是生物活性物质的发现和准确定量，亦会对白酒健康作用的证实提供坚实的数据支撑。本方明建立了一种绿色快速同时检测白酒中8种酚酸类物质，为酒类产品中酚酸类物质检测的准确判定、快速检测提供科学依据。

目前的标准和文献均采用高效液相色谱法和液质联用仪方法进行检测。其中，液相色谱法耗费大量的有机试剂，而且比较操作费时、麻烦，且使用的试剂流动相有毒，不利于人体健康。有文献报道采用串联四极杆法测试8种酚酸类物质，但是由于酚酸类物质分子量小，没有丰度高的碎片，且碎片太小，检测结果容易受到干扰。

此外，酒类产品中的酚酸类物质含量较少，使用原有的高效液相色谱法满足不了测试要求。

发明内容

本发明针对上述现有技术的不足，旨在提供一种超高效合相色谱串接QDa同时快速检测酒类产品中8种酚酸类物质的方法。本发明方法可以为酒类产品中8种酚酸类物质检测的准确判定、快速检测提供科学依据。

本发明所述8种酚酸类物质为没食子酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、对香豆酸、木犀草素、儿茶酸和琥珀酸。

本发明所用仪器为：配有QDa检测器的超高效合相色谱仪、色谱柱为3.0×100mm,1.8μm的HSS C18 SB Column；涡旋仪及移液枪。

本发明超高效合相色谱串接QDa同时快速检测酒类产品中8种酚酸类物质的方法，包括如下步骤：

步骤1：8种酚酸类物质的标准曲线的绘制

取没食子酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、对香豆酸、木犀草素、儿茶酸和琥珀酸配制质量浓度范围在5～1000ng/mL的混合系列标准工作溶液，然后分别取1～1.5mL各标准工作溶液进样，用UPC²串接QDa质谱检测器进行检测，以待测物的峰面积对其相应的质量浓度进行线性回归，获得8种酚酸类物质的线性回归方程，各线性回归方程所对应的曲线，即为相应酚酸类物质的标准曲线；

混合系列标准工作溶液中各组分的浓度控制在5～1000ng/mL，各组分在混合系列标准工作溶液中的质量浓度分别至少为六个不同的点值。

所述8种酚酸类物质对应的线性回归方程及相关系数r2见表1。

表1：8种酚酸物质的线性回归方程、相关系数、检出限、定量限