[发明专利]一种基于圆盘状毛细管微阵列的多重核酸检测方法

权利要求书

1.一种基于圆盘状毛细管微阵列的多重核酸检测方法，其特征在于，包含以下步骤：

第一步、将毛细管固定于PDMS基座微阵列中，经过疏水处理后，将若干组核酸扩增引物分别加入毛细管微阵列上的若干微管道中，再放置烘箱中干燥；

第二步、预制含有样品核酸的除引物外的其他核酸扩增反应组分，形成核酸扩增体系；

第三步、将反应预混液从圆盘状毛细管微阵列中心圆孔加入，并将圆盘状毛细管微阵列密封好置于控温条件下进行扩增反应；

第四步、通过简易的紫外检测装置对毛细管中的荧光信号进行检测和观察。

2.根据权利要求1所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述第一步中核酸扩增引物包括但不限于：普通PCR引物、实时定量PCR引物、环介导等温扩增引物、滚环扩增引物、重组酶聚合酶扩增引物，当所述核酸扩增引物为实时定量PCR引物时，引物是同相应探针一并加入微管道中的。

3.根据权利要求1所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述第一步中毛细管微阵列是圆盘状。

4.根据权利要求3所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述基于圆盘状毛细管微阵列的毛细管的外表面以及微管道底端内表面均为疏水性表面，毛细管通道内部为亲水性面。

5.根据权利要求1所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述第一步中加入具体指将核酸扩增引物溶于交联剂中后再加入毛细管通道中，所述交联剂为：质量百分比为0.1-1％的壳聚糖的乙酸水溶液，pH为4.5-6.0。

6.根据权利要求1所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述在第三步中加入具体指通过虹吸作用将其他核酸扩增反应组分引入各微管道中。

7.根据权利要求1或6所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述加入具体指通过圆盘状毛细管阵列的中心圆孔加入。

8.根据权利要求1所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述第四步中测量可以是借助荧光检测设备或光度检测设备进行检测，也可以是通过肉眼辨别颜色或亮度差异。

9.根据权利要求1至6或8中任一项所述的基于圆盘状毛细管微阵列的可视化多重核酸检测方法，其特征在于，所述方法既可以在单个反应管中单独实现，也可以在6通道、10通道甚至更多通道中实现。