[发明专利]一种检测炎症标志物活性的近红外荧光探针及其合成方法

说明书

本公开涉及一种检测炎症标志物活性的近红外荧光探针及合成方法。近红外荧光探针，其结构式为：其对LTA₄H蛋白具有特异性识别作用，当LTA₄H蛋白的活性中心识别该近红外荧光探针中相应的底物部分后，会切断酰胺键从而使探针荧光明显的增强。将其应用于体外检测与活细胞模型的研究中，都呈现出了良好的检测效果。

技术领域

本公开属于物质检测技术领域，具体涉及一种检测炎症标志物活性的近红外荧光探针及合成方法。

背景技术

外界环境和机体本身能够产生的损伤因子，它们会诱导细胞发生各种损伤性病变。为了控制和清除损伤因子，消灭和消化坏死细胞、组织，并修复机体的损伤，机体的局部和全身会发生一系列复杂的反应，这就是机体的防御性反应——炎症。正常的情况下，炎症是人体的自动防御性反应，有益于人体的健康，但有的情况下，炎症对人体也会是有害的。如果炎性反应长期存在，将会在组织内形成慢性炎症的微环境，会导致发生细胞DNA损伤、细胞恶性突变，血管恶性增生等病变，并会加快细胞的恶性增殖和癌症的产生和发展。因此，对炎症相关标志物的快速、准确检测将会对指示炎症和预防癌症具有十分重要的意义。

LTA₄H(Leukotriene A₄hydrolase)是一种具有双重活性的酶，已有文献报道LTA₄H是一种参与宿主防御过程中多肽降解的蛋白质，该蛋白在炎症过程中表达含量升高，与炎症的发生发展密切相关。现在对于检测LTA₄H与筛选其抑制剂的探针是极其缺乏的，应用于细胞及活体内检测LTA₄H的探针更是少之又少。

公开内容

针对上述现有技术中存在的问题，本公开的一个目的是提供一种检测炎症标志物活性的近红外荧光探针。一种检测炎症标志物活性的近红外荧光探针，命名为花菁近红外荧光探针(Cy-ASP)对炎症标志物LTA₄H的检测表现出高选择性。

为了解决以上技术问题，本发明的技术方案为：

一种检测炎症标志物活性的近红外荧光探针，其结构式为：

当LTA₄H蛋白的活性中心识别该近红外荧光探针中相应的底物部分后，会切断酰胺键从而使探针荧光明显的增强。将其应用于体外检测与活细胞模型的研究中，都呈现出了良好的检测效果。

本公开的有益效果：

1.本公开的探针分子具有近红外吸收(670nm)与发射(720nm)，有效地较低了自吸收，提高了成像准确度。

2.基于酶的底物专一性与分子内电荷转移原理，设计合成出特异性检测LTA₄H活性的荧光探针Cy-ASP，该探针与LTA₄H反应后发出强烈的红色荧光，能够指示LTA₄H的氨肽酶活性，而且Cy-ASP对LTA₄H具有极高的选择性，不会被其他的氨肽酶切断。

3.本发明的探针分子具有较低的细胞毒性，对细胞的损伤小。

4.本发明的探针分子合成步骤相对简单、产率较高、容易纯化。

附图说明

构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本申请的进一步理解，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。

图1是红外荧光探针Cy-ASP的质谱图；

图2是中间体c的质谱图；

图3是本发明荧光探针Cy-ASP与荧光团Cy-NH₂的紫外吸收光谱图，其中，横坐标为波长(nm)，纵坐标为紫外吸收强度；