[发明专利]一种增强向肿瘤部位迁移的嵌合抗原受体载体构建方法与应用

权利要求书

1.一种工程化的免疫细胞，其特征在于，所述工程化的免疫细胞表达一融合蛋白，所述的融合蛋白包含靶向NKG2DL的嵌合抗原受体CAR和趋化因子受体；

其中，所述融合蛋白的结构如下式I所示：

L-S-B-H-TM-C-CD3ζ-A-Q(I)

式中，所述“-”连接肽或肽键；

L为无或信号肽序列；

S为靶向NKG2DL的抗原结合结构域；

B为无或MYC标签；

H为无或铰链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

A为连接肽P2A；

Q为CXCR3；

并且，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，并且所述的免疫细胞是NK92细胞。

2.一种制备权利要求1所述的工程化的免疫细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(A)提供一待改造的免疫细胞；和

(B)对所述的免疫细胞进行改造，从而使得所述的免疫细胞表达靶向NKG2DL的嵌合抗原受体CAR和趋化因子受体，从而获得权利要求1所述的工程化的免疫细胞。

3.一种用于制备权利要求1所述的工程化的免疫细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有容器，以及位于容器内的：

(1)第一多核苷酸序列，所述第一多核苷酸序列含有用于表达所述CAR的第一表达盒；和

(2)第二多核苷酸序列，所述第二多核苷酸序列含有用于表达所述CXCR3的第二表达盒。

4.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求1所述的工程化的免疫细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

5.如权利要求4所述的制剂，其特征在于，所述制剂的剂型包括注射剂。

6.如权利要求4所述的制剂，其特征在于，所述制剂中所述工程化的免疫细胞的浓度为1×10³-1×10⁸个细胞/ml。

7.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述制剂中所述工程化的免疫细胞的浓度为1×10⁴-1×10⁷个细胞/ml。

8.如权利要求1所述的工程化的免疫细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述肿瘤选自下组：血液肿瘤、实体瘤、或其组合。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述血液肿瘤选自下组：急性髓细胞白血病(AML)、多发性骨髓瘤(MM)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性淋巴白血病(ALL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、或其组合。

11.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述实体瘤选自下组：胃癌、胃癌腹膜转移、肝癌、白血病、肾脏肿瘤、肺癌、小肠癌、骨癌、前列腺癌、结直肠癌、乳腺癌、大肠癌、宫颈癌、卵巢癌、淋巴癌、鼻咽癌、肾上腺肿瘤、膀胱肿瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、脑胶质瘤、子宫内膜癌、肺鳞癌、肛门癌、头颈部肿瘤、或其组合。